PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產(chǎn)物；Anneal溫度太低時，容易發(fā)生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear。
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 仙茅LAMP鑒定試劑盒供應商 |
英文名稱 | Rhizoma curculiginis |
貨號 | YSP9431 |
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，Z后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
CNP ELISA Ki 大鼠C型鈉尿肽四庚基溴化銨 PICalpha-六六六標準溶液49.8±2.6ug/ml,溶劑:異辛烷50ml尖底螺口離心管(Corning)
c-myc(Human c-myc Oncogene produc) ELISA Ki 人c-myc癌基因產(chǎn)物4-溴酸 99%六13C6標準溶液 100μg/ml,溶劑：醇50ml尖底螺口離心管(國產(chǎn))
CMV IgM 巨細胞病 IgM(捕獲法二步法)2-溴酸 98%六標準溶液 0.103mg/ml，基體：異辛烷50ml離心管架
CMV 巨細胞病 IgM(間接法二步法)二芐基酮 99%六標準溶液 0.101mg/ml，基體：異辛烷50ml離心管托
CMV 巨細胞病 IgM(捕獲法一步法)3,5-二基芐基溴 98%六標準溶液,52.6mg/L,溶劑:醇50ml平底螺口離心管(國產(chǎn))
CMV 巨細胞病 IgG(間接法二步法)二酮 98%異辛烷中β-六六六標樣 濃度范圍:98.2(mg/L)，分析標準品50ml圓底插口離心管(國產(chǎn))
CMR(Human cosimulaory molecules recpor) ELISA Ki 人協(xié)同刺激分子受體四庚基溴化銨 PIC七標準溶液 100μg/ml，溶劑：醇（劇品）50ml圓底螺口高速離心管 PP
CMLC-1(Human Cardiac myosin-ligh chains 1) ELISA Ki 人心肌肌凝蛋白輕鏈1咪唑 99%對二酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：醇50ml圓底內螺口離心管(國產(chǎn))
cmDNA(Human ani-cell membrane DNA anibody) ELISA Ki 人抗細胞膜DNA抗體4-基咪唑 98%β-六六六標準溶液100μg/ml，溶劑：醇50mm微孔濾膜(國產(chǎn)，0.22μm/0.45μm)
CLU(Human cluserin) ELISA Ki 人凝聚素1,2-并異噻唑啉-3-酮 98%β-六六六標準溶液 50.0µg/mL，基體：醇:=4:15ml 48孔 深孔板
仙茅LAMP鑒定試劑盒供應商Mouse POSN/OSF-2(Periosin) ELISA Ki培養(yǎng)基4-基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養(yǎng)基
Mouse Olr1(Oxidized low-densiy lipoproein recepor 1) ELISA Ki無菌液體石蠟Koser氏枸櫞酸鹽肉湯
Mouse Chi3l3(Chiinase-3-like proein 3) ELISA Ki兔血漿檸檬酸鈉EC肉湯
Mouse ACCPA(ani-cyclic cirullinaed pepide anibody) ELISA Ki酪胨-大豆卵脂-吐溫 20 液體培養(yǎng)基基礎Fluid Casein Diges-Soy Lecihin-Polysorbae20 Medium Base結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂(VRBA-MUG)
Mouse MMP-10(Marix Mealloproeinase 10) ELISA Ki吐溫 20Polysorbae 20結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)
Mouse MMP-13(Marix Mealloproeinase 13) ELISA Ki蛋白胨化鈉溶液煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB
Mouse ie1(yrosine-proein kinase recepor ie-1) ELISA Ki動物組織胃蛋白酶消化物Pepic diges of animal issue月桂基酸鹽胰蛋白胨肉湯(LS)
Mouse ek(Angiopoiein-1 recepor) ELISA Ki大豆-酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基Soybean-Casein Diges-Agar Medium乳糖蛋白胨培養(yǎng)液
Mouse PLAUR/uPAR(Plasminogen Acivaor, Urokinase Recepor) ELISA KiEuGOYn L 100 肉湯基礎EuGOYn L 100 Broh Base亮綠乳糖培養(yǎng)液（BGB）
Mouse Fs(Follisain) ELISA KiEuGOYn L 100 瓊脂培養(yǎng)基基礎EuGOYn L 100 Agar Medium Base膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)
