糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品：胞外分泌型絲氨/蘇氨蛋白激FAM20C抗體RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 熒光su標(biāo)記核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgG
8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC 熒光su標(biāo)記磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgG
血細(xì)胞亞群流式分析試劑專題
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611378-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義： 糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶，使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1，4-糖苷鍵移去葡萄糖基，釋放1-磷酸葡萄糖，直至臨近糖原分子α-1，6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進(jìn)行。 測(cè)定原理： 未添加激活劑時(shí)，GPa催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH，在340nm下測(cè)定NADPH上升速率，即可反映GPa活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）充分混勻，室溫靜置30min后，450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng)：
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢，其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝，以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋；當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí)，宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色，如果設(shè)置了使用說明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
一氧化氮合成酶-2抗體（誘導(dǎo)型）假單胞菌屬對(duì)羥基
干擾suα6抗體平菇新農(nóng)1號(hào)聚乙二4000
整合suβ2/Integrin β2抗體沙針草狀孢菌一縮二
抑制suA/Inhibin βA抗體灰紅鏈霉菌4-氨基苯乙酮
胰島su受體底物-3抗體茄拉爾氏菌苯并蒽酮
胰島su受體底物p53蛋白抗體膠質(zhì)芽孢桿菌*三苯基
胰島su受體底物-1抗體釀酒酵母硫suan銀
胰島su受體底物-2抗體紅法夫酵母*2-氨基噻唑
胰島su受體底物-4抗體布萊克威爾假絲酵母天麻su
白介su14抗體豬丹絲菌suan棗仁皂苷 B
腫瘤凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體枯草芽孢桿菌生姜油
Caspase激活的脫氧核糖核suan酶抑制劑抗體馬腸鏈球菌葒草苷
胰島su受體α抗體木蹄層孔菌23-乙酰澤瀉B
整合suα3β1抗體蘇云金芽孢桿菌黃柏酮
整合suβ7抗體弗雷德里克斯堡假單胞菌薄芝菌絲體粉
糖原磷酸化酶a(GPa)測(cè)試盒微量法絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)試劑盒 Anti-CEP97 Antibody抑癌蛋白DKK1抗原
核孔蛋白37kda(NUP37)試劑盒Anti-CEP97 AntibodyDMBT1抑癌基因抗原
乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8 (MFG-E8)試劑盒 Anti-CERS4 AntibodyDNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原
游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 Anti-CES2 Antibody多能發(fā)育相關(guān)基因2抗原
微精蛋白β(MSMβ)試劑盒Anti-CGREF1 Antibody死亡受體4抗原
三肽基肽酶I(TPP1)試劑盒Anti-CHAF1A Antibody腫瘤調(diào)亡su/死亡受體5抗原
骨成型蛋白3(BMP-3)試劑盒 Anti-CHAF1B Antibody橋粒斑蛋白1抗原
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
