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蘇丹紅ELISA試劑盒操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
酶聯(lián)板使用前用洗液板2-3次,每次浸泡1-2分鐘,250ul/每孔,甩干。
加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul,余孔從高到低分別加標準品或待測樣品50ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,然后在所有孔中加入50ul蘇丹紅抗體工作液。盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)30分鐘(為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液)。
溫育后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,250nl/每孔,甩干。
所有孔中加入100ul辣根過氧化物酶標記二抗工作液。盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)30分鐘。
溫育后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,250ul/每孔,甩干。
依序每孔加底物溶液90ul, 37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),一般10-15分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的后3-4孔有明顯的梯度藍色,前3-4孔顏色不明顯,即可終止)。
依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
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蘇丹紅ELISA試劑盒本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍:0.312ng/ml-10ng/ml
zui低檢測限:0.2ng/ml
特異性:本試劑盒可用于快速檢測蘇丹紅,與對們紅有一定交叉反應(yīng)。
有效期:6個月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定雞蛋、辣椒、辣椒醬等樣品中的蘇丹紅殘留。
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