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初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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全HEK293細(xì)胞系匯總

時(shí)間:2018/9/21閱讀:736
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   *,哺乳動(dòng)物細(xì)胞作為蛋白的表達(dá)系統(tǒng)具有糖基化、乙?;?、硫酸化、硫酸化等翻譯后修飾。而蛋白翻譯后修飾,如糖基化修飾,會(huì)直接影響蛋白在體內(nèi)的半衰期及穩(wěn)定性和生物學(xué)活性、影響配體識(shí)別及結(jié)合,影響其免疫原性,影響胞間作用等等功能。

目前,哺乳動(dòng)物細(xì)胞已被廣泛用于重組蛋白、疫苗、抗癌試劑及其他臨床相關(guān)的藥物的生產(chǎn)中。

CHO細(xì)胞、BHK細(xì)胞、Sp2/0等細(xì)胞常被用于制備生物制藥。然而這些小鼠來源的細(xì)胞與HEK293細(xì)胞相比,缺乏人的細(xì)胞翻譯后修飾系統(tǒng),因此與人源系統(tǒng)表達(dá)的蛋白有差異。目前,HEK293細(xì)胞被廣泛用于生產(chǎn)蛋白、疫苗、抗癌試劑及重組腺病毒包被等。

HEK293細(xì)胞

 

1) 轉(zhuǎn)染效率高;

2) 可懸浮培養(yǎng)用于大規(guī)模表達(dá);

3) 表達(dá)蛋白結(jié)構(gòu)接近其在人體內(nèi)構(gòu)象;

4) HEK293細(xì)胞在培養(yǎng)體系中能夠快速增長(zhǎng),高密度培養(yǎng)。

5) HEK293細(xì)胞與神經(jīng)元細(xì)胞一樣,對(duì)外界微環(huán)境較為敏感,利用這一特點(diǎn),可用于藥物發(fā)現(xiàn)及細(xì)胞毒性測(cè)試。

293T細(xì)胞

 

293細(xì)胞中轉(zhuǎn)入SV40T-antigen基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株,即為293T細(xì)胞系。這使得包含SV40ori的質(zhì)粒能夠在該細(xì)胞系中顯著擴(kuò)增,從而促進(jìn)表達(dá)載體的擴(kuò)增,促進(jìn)蛋白的表達(dá)。

293T細(xì)胞除了可用于各類基因表達(dá)及蛋白生產(chǎn),還可用于高滴度逆轉(zhuǎn)錄病毒及其他病毒生產(chǎn),如腺病毒及其他哺乳動(dòng)物病毒。

 

293T/17細(xì)胞

 

293T細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染入pBND 和 pZAP 質(zhì)粒,獲得的具有G418耐受的細(xì)胞系即為293T/17細(xì)胞系。該細(xì)胞系在保有293T細(xì)胞的優(yōu)良性能之外,還具有高轉(zhuǎn)染性的特點(diǎn)。

 

293T/17 SF細(xì)胞

 

293T/17 SF細(xì)胞系指的是在293T細(xì)胞中轉(zhuǎn)入EBV基因形成的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,該細(xì)胞系主要用于細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及蛋白表達(dá)。

 

293H細(xì)胞

 

293H細(xì)胞則指的是將293細(xì)胞馴化后得到的能夠在無血清培養(yǎng)體系下快速生長(zhǎng)、具有高轉(zhuǎn)染效率及蛋白表達(dá)性能的細(xì)胞系。另外,該細(xì)胞系貼附力好,而被用于噬菌斑檢測(cè)等應(yīng)用。

 

293E細(xì)胞

 

293E細(xì)胞指的是在293-H細(xì)胞中插入EBNA-1基因的細(xì)胞系,該基因能夠穩(wěn)定表達(dá)EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV復(fù)制起點(diǎn)(oriP)的重組表達(dá)質(zhì)粒,能夠在H293E細(xì)胞中復(fù)制,并實(shí)現(xiàn)蛋白的表達(dá)。

 

293-6E細(xì)胞

 

293-6E細(xì)胞則是在293-H細(xì)胞中插入截短過后的EBNA-1基因的細(xì)胞系,其能夠在無血清培養(yǎng)基中高表達(dá)生產(chǎn)蛋白及病毒載體。

 

293F細(xì)胞

 

293F細(xì)胞是一類能夠在無血清中高表達(dá)蛋白的野生型293細(xì)胞系。

 

293FT細(xì)胞

 

293FT細(xì)胞則是在293F細(xì)胞系中插入pCMVSPORT6TAg.Neo 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,能夠快速增值,易轉(zhuǎn)染,其能夠用于慢病毒載體的生產(chǎn)。

 

293FTM細(xì)胞

 

293FTM細(xì)胞則是來源于Flp-InTMT-RETM293細(xì)胞,該細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染了ecotropic receptor質(zhì)粒及MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)報(bào)告質(zhì)粒,該細(xì)胞系主要用于蛋白互作的篩選。

 

293S細(xì)胞

 

293S細(xì)胞則指的被馴化成能夠懸浮培養(yǎng)且能夠耐受低鈣離子培養(yǎng)條件的293細(xì)胞系。

 

293SG細(xì)胞

 

將293S細(xì)胞用甲基磺酸乙酯誘變處理,蓖麻毒素選擇后再轉(zhuǎn)染pcDNA6/TR質(zhì)粒得到耐受蓖麻毒素的細(xì)胞系即為293SG。

該細(xì)胞系缺乏乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶I活性,因此可促進(jìn)蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修飾。此外,該細(xì)胞系中具有四環(huán)素表達(dá)抑制基因,可用于四環(huán)素誘導(dǎo)的蛋白表達(dá)研究。

這類細(xì)胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表達(dá)。

 

293SGGD細(xì)胞

 

293SGGD細(xì)胞系則指的是在293SG轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-zeo-STendoT質(zhì)粒的細(xì)胞系,其主要用于糖基化工程研究中。

                              HEK293細(xì)胞系概覽  

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