當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞增殖/毒性檢測>> Brdu100mg實驗方法
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更新時間:2017-07-06 08:58:17瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Brdu100mg實驗方法COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-R034大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
SGC-7901/VCR細胞,人耐VCR胃腺癌細胞 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞,BT-325細胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7
人胎盤絨膜癌細胞;BeWo
CA12 Others Human 人 CA12 人細胞裂解液 (陽性對照)
Brdu100mg實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Brdu100mg實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Brdu100mg實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
人腦瘤細胞;SF126
IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照)
SD大鼠脂肪間質(zhì)干細胞 SD rat adipose mesenchymal stem cells
BT-325細胞,人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 空腸彎曲菌 人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1
SNU-5(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Hep G2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0442SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2
14. 心臟細胞系統(tǒng)
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WML6.0
CL-0035BIU-87(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成纖維細胞;φ2 小鼠氣管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
HCT116/L 人結(jié)腸癌耐*耐藥株
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅蛋白C(HbC)免疫試劑盒 Human Hemoglobin C,HbC ELISA Kit
人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-tox IgM ELISA Kit
RatInterleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlomerulartissueextract-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISA試劑盒人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin23,IL-23ELISAKit人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human varicella zoster virus IgM (VZV-IgM) ELISA Kit 人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA試劑盒
HumanFibrinogen,FbgELISAKit 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAnti-trypsin,AISA試劑盒人抗*(AT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量檢測試劑盒(羥自由基)20次
humantranGSlutaminase2Cpolypeptide,TGM2ELISAKit人轉(zhuǎn)*酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Brdu100mg實驗方法兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子胰島素(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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