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更新時間:2017-07-06 08:55:23瀏覽次數(shù):127次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CHL(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-R106大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
KYSR450細胞,人食管癌細胞 人XG惡性膠質(zhì)瘤細胞,SF-295細胞 豬靜脈血管內(nèi)皮細胞;ZYM-SVEC01
小鼠腦瘤細胞;BC3H1
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照)
急性T淋巴細胞白血病細胞;TALL-104
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells
SK-N-MC細胞,人神經(jīng)上皮瘤細胞 蠟樣芽孢桿菌 人腎小球內(nèi)皮細胞RNAHRGEC miRNA5 μg
SF763(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HCT 116(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
PDGFC Others Human 人 PDGF-C / SCDGF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
CL-0105Hepa 1-6(小鼠肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
HuH-7人肝癌細胞 前列腺癌細胞,LNCa細胞 MDA-MB-435S(癌細胞)
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino
IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠尿皮質(zhì)素2(UCN2)ELISA試劑盒 ,英文名: UCN2 ELISA Kit
人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測試劑盒Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T
大鼠游離睪酮(F-TESTO)免疫試劑盒 Rat Free Testosterone,F-TESTO ELISA Kit
英文名稱HumanCD163ELISAKit人CD163規(guī)格:96T/48T
二苯基甲酰胺(diphenylformamide)25毫克
ELISAKitIL-10山羊白介素10規(guī)格:48T/96T
小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒
HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-thrombinreceptor,ATRELISA試劑盒人抗*受體(ATR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物線粒體核糖體分離試劑盒10次
HumanTrichinellaantibodyELISAKit人旋毛蟲抗體(TrichinellaAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T免費代測豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠特異性免疫球蛋白E(sIgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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