我司酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法本著標準*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞) 5×106cells/瓶×2

CM-M005小鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

TNFRSF9 Others Canine 狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)

KYSE 450細胞，人食管鱗癌 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞,CRT細胞 家兔腎細胞;RABK3

小鼠腎足細胞;Mouse podocyte

PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2

IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0285L-O2(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 小鼠胚胎成纖維細胞，3T6swiss細胞 Hs 1.Tes(正常人細胞)

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;MuM-2C

NCSTN Others Human 人 NCSTN / Nicastrin 人細胞裂解液 (陽性對照)
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)

JAR 人胎盤絨毛癌細胞

RWPE-1人正常前列腺上皮細胞 RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF

FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽)

小鼠神經(jīng)黑質(zhì)細胞(MN-sn)(1×106) T24, 人膀胱癌細胞 Human
大鼠總抗氧化能力( T-AOC) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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Ratinterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISA試劑盒大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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