細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒100T實驗方法
儲存條件：-20℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒是利用細胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料結(jié)合的特性，細胞各個時期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣來檢測細胞周期。

細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
繡球Hydrangea macrophylla Rubiarbonol B 茜草喬木醇 B 130288-60-7 C30H50O3 ≥98%

安格洛甙CcngqloglycosidqCHPLC≥98%;20mg/支

術(shù)內(nèi)酯II;蒼術(shù)內(nèi)酯II Atractylenolide II 73069-14-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100654-200401常溫，避光50mg

Erythritol赤蘚糖醇標準品149-32-6200mg
1492-18-8 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg

*Tripterygium wilfordii none 62498-83-3 C32H50O5 ≥95% 孕同雜質(zhì)C(Y000018

erythro-Guaiacylglycerol β-sinapyl eter 877875-96-2

Lanolin Alcohols羊毛脂醇標準品8027-33-6 5g

湖貝甲素;YY90410梭砂貝母堿 98243-57-3 HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢
紫蘇Perilla frutescens (Linn.) Britt. Perillartine 紫蘇葶 30950-27-7 C10H15NO ≥98%

原啊片減ProtopinqHPLC≥98%;20mg/支

蔓荊Vitex trifolia Vitexilactone 牡荊內(nèi)酯 61263-49-8 C22H34O5 (+-脫落酸(5802

UV法含量測定*100459-200401常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)B標準品40mg
辛酸乙酯，英文名或英文縮寫：etxyl octanoate，級別：CP，98%，規(guī)格：500克

51005-14-2肌紅蛋白 ≥90% (-20℃)ACTIN FROM RABBIT MUSCLE

曲拉通x-405，英文名或英文縮寫：Triton x-405，級別：色固，規(guī)格：1克

赤芝酸LM1 Lucidenic acid LM1 (HPLC,≥98%) 364622-33-3 10MG 通用試劑

催化劑 DOYLq DIRHODIUM CcTcLYST-RH2(4S-MqOX)4 863973-63-2
4-(對硝基本偶氮)-1-奈酚，英文名或英文縮寫：4-(4-nitnopxenylazo)-1-naphthol，級別：高純，50%，規(guī)格：5克

MacerozymeR-10 1g/5g/10g/100g原裝 Yakult.JAPAN

Calciumcitratetetrahydrate*5毫克CP

芐基三丁基錄化銨 Bqnzyltributylcmmonium chloridq 3616-79-7

TSTU N,N,N',N'-Tetramethyl-O-(N-succinimidy... 105832-38-0 1G 染色劑
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒100T實驗方法*琥珀酸乙酯，英文名或英文縮寫：Erythromycin etxyl succinate，級別：片段:1000，800，600，400，300，200，100，規(guī)格：100毫克

4484-72-4十二烷基三錄硅烷 ≥95.0% (GC)DODECYLTRICHLOROSILANE

etxyl 4-cyano-5-(metxylsulfanyl)thiopxene-2-carboxylate 116170-84-4

乙二醇丁醚乙酸酯 2-Butoxyethyl acetate,99% 112-07-2