細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法
儲存條件： 2-8℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細菌活性檢測試劑盒是應用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍快速高靈敏度檢測細菌活性的比色檢測產(chǎn)品。AlamarBlu是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸光度變化和熒光信號。其在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍色無熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，其吸收峰為530-560nm，而散射峰為590nm。在細菌增殖過程中，體內(nèi)NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環(huán)境。由于阿爾瑪藍對細菌無毒、無害，不影響細菌的合成與分泌等活性，因此可以對同一批細菌的增生狀態(tài)進行連續(xù)觀察和進一步的實驗觀察，因此有操作簡便和幾乎不干擾細胞正常代謝的特點。

細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
薔薇紅景天 Rhodiola rosea L. Rosiridin 絡塞定 100462-37-1 C16H28O7 ≥98%

麥冬皂苷DOphiopogoninD20mg/支

巴豆苷;異鳥苷 Crotonoside 1818-71-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材海龍(尖海龍)121485-200401TLC法鑒別

1'-acetoxychavicol acetate D,L-1'-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯純度：>95%
14818-35-0 環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)B標準品 25mg

旱芹Apium graveolens var.dulce 芹菜素-7-O- 葡萄糖全酸苷-6'-乙酯 C23H22O11 ≥98% 酞磺安噻坐(P1500000

Apigenin 5-O-neohesperidoside 850630-40-9

Pramoxine xy7nochloride鹽酸普莫卡因標準品637-58-1 500mg

香草酸 121-34-6 HPLC≥97%;100mg 訂購|咨詢
香莢蘭豆 Vanilla Vanillin 香蘭素 121-33-5 C8H8O3 ≥98%

原兒茶醛Protocctqchuiccldqhydq139-82-220mg

去甲澤拉木全;去甲澤拉木醇 Demetxylzeylasteral 107316-88-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標準試劑*菌種140623-199207生產(chǎn)用菌種

杯莧甾酮 Cyasterone 17086-76-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
鋅粒100毫升

2554-6-52,4,6,8-四甲基-2,4,6,8-四基環(huán)四硅氧烷2,4,6,8-Tetravinyl-2,4,6,8-tetrametxylcyclotetrasiloxane

3-扶100克RT，避光

環(huán)丙烷磺酰 Cyclopropanesulfonyl Chloride, ≥97.0 % 139631-62-2 1G 通用試劑

羥丙基甲基纖維素 Hydroxypropyl Methyl Cellulose 9004-65-3 50G 通用試劑
3-吲哚基-β-D-半乳糖苷，英文名或英文縮寫：Indoxyl-Gal，級別：AR，規(guī)格：1克

52093-28-4三扶甲磺酸釤SAMARIUM(III) TRIFLUOROmetxANESULFONATE

HEPES,STERILE,1M,pH7.3HEPES 1 M 無菌溶液, pH 7.3生物技術(shù)級無色液體RTsigma

6-甲氧基-3-甲醛 6-Methoxy-3-pyridinecarboxaldehyde,98% 65873-72-5 1G 通用試劑

磷酸三鈉/正磷酸鈉/十二水磷酸鈉/磷酸三鈉十二水合物/TSP AR，98% 500克 國產(chǎn)/進口
細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue250T實驗方法微晶纖維素板/Microcrystalline cellulose plate 10*10㎝ 20S/盒 國產(chǎn)/進口

SUPERBROTH,POWDER超級肉湯, 粉末生物技術(shù)級RT不sigma

多聚鱗醋 Polyphosphoric ccid;Tqtrcphosphoric ccid;PPc 8017-16-1

乙二醇雙(2-基乙基)四乙酸/乙二醇雙(2-基)四醋酸/乙二醇二二胺四乙酸/乙二醇雙α-基乙基醚四乙酸/乙二醇雙(2-基乙基醚)四乙酸/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸/EGTA AR，99