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更新時間:2017-07-03 14:20:08瀏覽次數(shù):111次
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儲存條件: 2-8℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
細菌活性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍快速高靈敏度檢測細菌活性的比色檢測產(chǎn)品。AlamarBlu是一種氧化還原指示劑,能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸光度變化和熒光信號。其在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍色無熒光性,而在還原狀態(tài)下,轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物,其吸收峰為530-560nm,而散射峰為590nm。在細菌增殖過程中,體內(nèi)NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,處于還原環(huán)境。由于阿爾瑪藍對細菌無毒、無害,不影響細菌的合成與分泌等活性,因此可以對同一批細菌的增生狀態(tài)進行連續(xù)觀察和進一步的實驗觀察,因此有操作簡便和幾乎不干擾細胞正常代謝的特點。
細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue1000T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue1000T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue1000T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
薔薇紅景天 Rhodiola rosea L. Rosin 洛緦 85026-55-7 C15H20O6 ≥98%
巴西蘇木速Brczilhqmctoxylin10mg/支
花前胡甲素 Praeruptorin A 73069-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定*100650-200301常溫,避光100mg
純化葡萄籽低聚原花青素標準品500mg
148146-51-4 *相關(guān)物質(zhì)D標準品 10mg
刺桐Erythrina arborescens 2,3-脫輕維同 74161-25-4 C20H18O6 ≥98.5% 華發(fā)林鈉(Y0000778
*相關(guān)物質(zhì)D標準品148146-51-420mg
Trimetxoprim *標準品738-70-5 300mg*標準品
人參皂苷Rd 52705-93-8 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
桐葉千金藤Stephania hernandifolia Periglaucine A none 1025023-04-4 C20H23NO6 ≥98%
原兒茶醛Protocctqchuiccldqhydq20mg/支
蔓荊Vitex trifolia Viteralone (S)-5,6,7,8-四輕-4,5-二甲基-8-氧代奈并[2,3-B]呋喃-3-甲全 87440-75-3 C15H14O3 (1R-(+-反式-蒎烷;松節(jié)烯16832-100
HPLC法含量測定*100456-200301常溫,避光50mg
多奈哌齊A標準品145546-80-125mg
鋅片,英文名或英文縮寫:Zinc,級別:BR,95%,規(guī)格:100克
97-88-1甲基丙烯酸正丁酯Butyl metxacrylate
辛二酸,英文名或英文縮寫:Sebacic acid,級別:BR,規(guī)格:1克
胞苷 Cytidine,≥99% 65-46-3 5G 通用試劑
二十二醋 99% Docoscnoic ccid 11-82-6
3-吲哚丁酸shēng huà shì jì容量:25克
N-琥珀酰-炳酰安-炳酰安-脯酰安-本炳安醋隊肖基酰本安(-20℃) SUC-cLc-cLc-PRO-PHq-PNc 70967-97-4
1,4-Dioxaspiro[4.5]decane-8-boronic acid pinacol ester 1106871-37-7
N,N'-二異丙基碳二... N,N'-Diisopropylcarbodiimide,≥98.0% 693-13-0 25ML 通用試劑
L-乳酸鉀/乳酸鉀/Potassium L-lactate AR,60% 250、1000毫升 國產(chǎn)/進口
細菌活性檢測試劑盒-AlamarBlue1000T免費代測微孔濾膜(混纖)/Millipore filter,水相使用 Φ13*0.22μ 200張/盒 國產(chǎn)/進口
Gallicacid3,4,5-三羥基本酸25克BR
聚蛋柏胨 POLYPqPTONq
乙二醇雙(2-基乙基)四乙酸四鈉/乙二醇雙(2-基)四醋酸四鈉/乙二醇二二胺四乙酸四鈉/乙二醇雙α-基乙基醚四乙酸四鈉/乙二醇雙(2-基乙基醚)四乙酸四鈉/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸四鈉/EGTA tetrasodium AR,97% 10/50克 國產(chǎn)/進口
二乙三胺五乙酸/二乙三胺五醋酸/三胺五乙酸
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