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細菌活性檢測試劑盒-CCK8500T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
細菌活性檢測試劑盒-CCK8500T使用說明書儲存條件: 2-8℃避光保存。
*不用分裝后-20℃避光保存。避免反復凍融。
有效期: 一年。
產品簡介:
細菌活性檢測試劑盒 (CCK-8法) 是應用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細菌活性的比色檢測產品。
本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與細菌的活性成正比。細菌活性越強,則顏色越深;細菌活性越弱,則顏色越淺。
對于同樣的細菌,顏色的深淺和細菌活性呈線性關系。 CCK-8溶液可以直接加入到細菌樣品中,不需要預配各種成分,CCK-8溶液很穩(wěn)定,對細菌沒有毒性,可以長時間培養(yǎng)細菌。
細菌活性檢測試劑盒-CCK8500T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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Coronalolide metxyl ester CORONALOLIDE metxYL ESTER 268214-50-2
*相關物質C標準品552-63-6 15mg*相關物質C標準品
似梨木雙黃酮;Ochnaflavone7 訂購|咨詢
鋅片5克RT,避光
98-95-3(易)etxylenediamine
1,2,4-丁三醇25克
2,5-二硝基苯 2,5-Dichloronitrobenzene,99% 89-61-2 100G 通用試劑
還原輔酶Ⅱ四鈉鹽/*腺嘌呤二核苷酸磷酸四鈉鹽/*腺嘌呤雙核苷酸磷酸四鈉鹽/β-NADPH/TPNH2 Na4 BR,98%, 25毫克 Roche
3-吲哚丙酸鉀shēng huà shì jì容量:5克
1393-48-2硫鏈絲菌肽(-20`C)THIOSTREPTON
3-Thiopxenesulfonyl chloride 51175-71-4
油酸甲酯 Methyl oleate,99% 112-62-9 5G 通用試劑
TRIS1.5MpH8.8Tris溶液超純級無色無混濁液體RTsigma
細菌活性檢測試劑盒-CCK8500T使用說明書1,8-ANSN-本基-8-奈胺-1-磺酸5克高純
三拂磺醋鐿 YTTqRBIUM(III) TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq HYDRcTq 24761-04-2
3-pxenoxythiopxene-2-carbaldehyde 132706-25-3
乙二醇水楊酸酯 Ethylene glycol monosali,≥98.0% 87-28-5 25G 通用試劑
色胺/3-(2-乙基)吲哚/β-吲哚基乙胺/2-(3-吲哚基)乙胺/Tryptamine BR,98% 1克 國產/進口
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