產(chǎn)品名稱：Alamar Blue細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測
儲存條件： 2-8℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍(lán)快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。

AlamarBlu是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸光度變化和熒光信號。其在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍(lán)色無熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，其吸收峰為530-560nm，而散射峰為590nm。在細(xì)胞增殖過程中，細(xì)胞內(nèi)NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環(huán)境。攝入細(xì)胞內(nèi)的染料被這些代謝中間體及細(xì)胞色素類還原后釋放到細(xì)胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍(lán)變成有熒光的粉紅色。后用普通分光光度計或熒光光度計進(jìn)行檢測，吸光度和熒光強(qiáng)度與活性細(xì)胞數(shù)成正比。這種染料經(jīng)過驗證安全無毒，用于細(xì)胞活性和細(xì)胞增殖的定量分析以及細(xì)胞因子生物測定和體外細(xì)胞毒性研究。 這種測定是基于具有代謝活性的細(xì)胞將試劑轉(zhuǎn)換成熒光和比色指示劑的能力。 受損和無活性細(xì)胞具有較低的天然代謝活性，因此對應(yīng)的信號較低。

Alamar Blue細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Alamar Blue細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Alamar Blue細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
三七pseudo-ginseng R-Notoginsenoside R2 R-三七皂苷R2 C41H69O13 ≥98%

升麻醇-3-O-β-D-木糖苷#NAMEHPLC≥98%;10mg/支

果內(nèi)酯 Bilobalide 33570-04-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

鑒別用安丁三醇100643-200501常溫，避光100mg

Estriol雌三醇標(biāo)準(zhǔn)品50-27-1100mg
145546-80-1 多奈哌齊A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

原花青速B2;原矢車菊速B2ProcyanidinB2;procyanidinB29106-49-8HPLC≥98%,5mg/支

NiMbin 印楝素 5945-86-8

炔螨特 標(biāo)準(zhǔn)品 號：2312-35-8 100mg

米托拉酮 87626-55-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
綿毛馬兜鈴 Aristolochia mollissima Hance Vanillic acid 香草酸 121-34-6 C8H8O4 ≥98%

原花青速Procnthocycnidins482--620mg

去甲異波爾定;去甲基異波爾定 Norisoboldine 23599-69-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

TLC法有關(guān)物質(zhì)*雜質(zhì)A100960-200801常溫，避光50mg

斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
猩紅S，英文名或英文縮寫：Ponceau S，級別：CP，50-60%，規(guī)格：5毫克

62086-04-8三扶甲磺酸亞錫TIN(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE

CYCLO-PREPPLASMIDDNAPURIFICATIONKIT質(zhì)粒DNA純化試劑盒生物技術(shù)級RTsigma

反式-2-癸烯醛 trans-2-Decenal,≥95.0% 3913-81-3 5ML 通用試劑

磷酸氫/三水磷酸/二堿式鹽/ phosphate dibasic trihydrate CP，98% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口
3-巰基-1,2-丙二醇，英文名或英文縮寫：1-Thioglycerol，級別：BR，98%，規(guī)格：250克

Maltose 100g/1kg原裝 Sigma M2250

Ammoniumiodide化铔5毫升AR，99%

本磺酰(*) Bqnzqnqsulfonyl hydrczidq 80-17-1

葡聚糖 T-500 (右旋... Dextran T-500 (分子量:500,000) 9004-54-0 10G 分離試劑
Alamar Blue細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒500T免費代測1,3-二甲基，英文名或英文縮寫：Theophylline，級別：高純，98%，規(guī)格：2KU

11138-49-1鋁酸鈉;偏鋁酸鈉wo7ium aluMinate;AluMinuM wo7ium oxide

wo7iumGluconate*高純級白色至微黃色精細(xì)結(jié)晶RTsigma

乙基黃原酸鉀 Potassium ethyl xanthogenate,96% 140-89-6 10G 通用試劑

四甲基硅烷 Tetramethylsilane,≥99.99% 75-76-3 25ML 通用試劑