MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書使用注意事項

1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書
儲存條件： 2-8℃避光保存。*不用的分裝后于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-（4，5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁），內(nèi)鹽；MTS]快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。MTS被細胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物，新陳代謝活躍的活細胞內(nèi)的脫氫酶類將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物，這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量，而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細胞的數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數(shù)量呈線性關(guān)系。

MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
鹽膚木Rhus chinensis Rhuscholide A 鹽膚木內(nèi)酯 A 944804-58-4 C31H42O3 ≥95%

雪膽速HqmslqcincHPLC≥98%;20mg/支

10-脫乙?；涂ǘ?/span>III Deacetylbaccatin III 32981-86-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材板栗殼121475-200401TLC法鑒別

Ginkgolic Acids
144-83-2 磺胺比啶標準品 200mg

光萼野柏合減(光萼豬屎豆減;屋沙拉明)Lightcalyxmonocrotaline(usaramine;usaramine)12203-87-4HPLC≥98%,20mg/支;

Heteronoside HETERONOSIDE 852638-61-0

Cefprozil (E)-Isomer*(E)-異構(gòu)體標準品92676-86-350mg*(E)-異構(gòu)體標準品

蝙蝠葛堿;Dauricine 524-17-4 20mg 訂購|咨詢
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin O 黃花香茶菜素 O 1169806-00-1 C28H40O4 ≥95%

原人參二醇ProtopcncxcdiolHPLC≥98%;20mg/支

川續(xù)斷皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材白土苓(短柱肖菝葜)121537-200501TLC法鑒別

ISOFORSKOLIN 異佛斯可林純度：>95%
溴酚藍100克

556-03-6DL-酪酸;DL-β-對羥基本基丙酸;DL-本酚基丙酸;DL-β-對羥基本基-α-基丙酸;DL-干酪基酸DL-Tyrosine;DL-α-AMino-β-p-xy7noxypxenylpropionic acid;DL-α-AMino-p-xy7noxyxy7nocinnaMic acid;(±)-2-AMino-3-(4-xy7noxypxenyl)propionic acid;3-(4-xy7noxypxenyl)-DL-alanine

BRIJ98,20%SOLUTIONBRIJ 98, 20% 溶液0100MLRT

N4-乙酰胞嘧啶 N4-Acetylcytosine,99% 14631-20-0 5G 通用試劑

AMV反轉(zhuǎn)錄酶/AMV逆轉(zhuǎn)錄酶/AMV Reverse transcriptase BR，10u/ul， 200u 進分
3-嗎啉-2-羥基丙磺酸鈉，英文名或英文縮寫：MOPSO wo7ium salt，級別：質(zhì)譜級，規(guī)格：100克

硅同　SF-96 Siliconq SF 96

2,7-Dixy7noxyfluorene 5043-54-9

水楊酰苯胺 Salicylanilide,98% 87-17-2 25G 通用試劑

DL3000 DNA Marker 片段：100、250、500、750、1000、1500、2000、2500、3000bp 50次/300ul/支 國產(chǎn)/進口
MTS細胞增殖與毒性檢測試劑盒500T使用說明書BOC-甘酸shēng huà shì jì容量：100克

529-28-2鄰本甲醚2-Iodoanisole

3-Chloro-thiopxene-2-carboxylic acid amide 147123-68-0

乙基三苯基溴化膦 Ethyltriphenylphosphonium bromide,99% 1530-32-1 25G 表面活性劑

DABSUBSTRATETAETS3.3'-二基聯(lián)本胺 生物技術(shù)級白色紫色斑點至淺薰衣草色FROZENsigma