MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件： 2-8℃避光保存。*不用的分裝后于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性甲臢化合物[3-（4，5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁），內(nèi)鹽；MTS]快速高靈敏度檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。MTS被細(xì)胞生物還原成一種可溶于組織培養(yǎng)基的甲臢化合物，新陳代謝活躍的活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶類將MTS轉(zhuǎn)化成液態(tài)可溶的甲臢化合物，這種甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上測量，而不需要另外作處理。由490nm測量的吸收值所表示的甲臢產(chǎn)物的數(shù)量與培養(yǎng)物中活性細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。

MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
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澳洲茄邊減;奧洲邊茄減 Solamargine 20318-30-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

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白術(shù)內(nèi)酯II;蒼術(shù)內(nèi)酯II Atractylenolide II 73069-14-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
溴化鎘，英文名或英文縮寫：Cadmium bromide，級(jí)別：2N，200目，規(guī)格：1克

(b-環(huán)狀糊精)

URICACID尿酸試劑級(jí)25G69-93-2RT

兩性電解質(zhì) cMPHOLYTq CcRRIqR, PH 5.0-7.0

Malonamide丙二酰胺1克超純，99%
3-嶙酸甘油脫氫酶-嶙酸丙糖異構(gòu)酶，英文名或英文縮寫：GDH-TPI，級(jí)別：生物技術(shù)級(jí)，98%，規(guī)格：100克

13126-12-0銣RubidiuM nitnate

pxenOLRED酚紅ACS級(jí)亮紅色粉末RTsigma

磷酸鈉十二水 Sodium phosphate tribasic dodecahydrat... 10101-89-0 100G 通用試劑

反式-1,2-環(huán)己二胺 trans-1,2-Cyclohexanediamine,99% 1121-22-8 10ML 通用試劑
MTS細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法人型支原體快速培養(yǎng)基支RT

14459-95-1亞鐵potewwium ferrocyanide trihyrate

二正辛胺1公斤

乙基叔丁基醚 tert-Butyl ethyl ,99% 637-92-3 10G 通用試劑

偶氮胂Ⅰ/鄰苯胂酸偶氮-1,8-二羥基-3,6-二磺酸鈉/2-(鄰胂酸偶氮苯)-1,8-二羥基-3,6-二磺酸鈉/鈾試劑/新釷試劑/偶胂偶氮/Arsenazo I AR，80% 5克 國產(chǎn)/進(jìn)口