CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T使用說(shuō)明書儲(chǔ)存條件： 2-8℃避光保存。*不用分裝后-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒CellCountingKit-8(CCK-8)是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測(cè)細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的比色檢測(cè)產(chǎn)品。本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan，生成的Formazan量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中，不需要預(yù)配各種成分，CCK-8溶液很穩(wěn)定，對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性，可以長(zhǎng)時(shí)間孵育細(xì)胞。CCK-8法測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的靈敏度高，無(wú)放射性，檢測(cè)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它方法如MTT,XTT,MTS和WST-1高。

CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
我司CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T使用說(shuō)明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式！我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢！
地黃 Rehmannia glutinosa Libosch. RhMannioside D 地黃苷D 81720-08-3 C27H42O20 ≥98%

苦玄參苷IAPicfqltcrrcqninIcHPLC≥98%，20mg/支

β-桉葉醇;Β-桉葉醇 β-Eudesmol 51317-08-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材桃金娘果121471-200401TLC法鑒別

DECURSIN紫花前胡素純度：≥97%
144701-48-4 *標(biāo)準(zhǔn)品 150mg

本酰新屋頭原減;本酰中屋頭原減Benzoylnewaconine;Aconitumbenzoylinalkali6338-67-2HPLC≥98%,20mg/支

metxyl 2-(6-acetyl-5-xy7noxy-2,3- dixy7nobenzofuran-2-yl)propenoate (2S)-6-乙?；?/span>-2,3-二輕-5-輕基-ALPHA-亞甲基-2-本并呋喃乙酸甲酯 617722-56-2

 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)： 100MG

柚皮苷查爾酮
大豆Glycinemax(L.)merr Soyasaponin Ba 大豆皂苷Ba 114590-20-4 C48H78O19 ≥98%

原*ProtodioscinHPLC≥98%，20mg/支

遠(yuǎn)志皂苷A Onjisaponin A 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品新霉胺130411-200307檢查

Cyanidin chloride錄化花青素純度：>98%
*1克RT，避光

630-06-8三十六烷;正三十六烷Hexatriacontane

組蛋白25克

5-溴* 5-Bromouracil,98% 51-20-7 5G 通用試劑

固紅TR/固紅-磺酸TR/快紅/固紅/快紅TR/4--2-甲基重氮苯 1,5-二磺酸鹽/Fast red TR 高純 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
3-甲基環(huán)戊烷-1,2-二酮，英文名或英文縮寫：3-metxyl-1,2-cyclopentanedione，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：100克

9005-71-4吐溫65;吐混65;聚氧山梨糖醇酐三硬脂酸酯;聚氧失水*三硬脂酸酯;聚乙氧基三硬脂酸清涼茶醇Tween 65;Polysorbate 65

α-乳糖，英文名或英文縮寫：α-D-Lactose monohydrate，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：500U

化鈷，六水 Cobalt chloride hexahydrate 7791-13-1 50G 通用試劑

2,3-二溴-1-丙烯 2,3-Dibromopropene,≥95.0% 513-31-5 25G 通用試劑
CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T使用說(shuō)明書D-葡萄糖-6-嶙酸三鈉鹽25克RT

1632-89-9氘代乙醛ACETALDEHYDE-D4

1,8-Diazanepxtxelene 254-60-4

乙硫醇 Ethanethiol, >98.0% 1975-8-1 100ML 多肽試劑

碳酸鍶shēng huà shì jì容量：RT25克