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細胞培養(yǎng)的常見問題解析

時間:2018-2-5閱讀:75
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細胞培養(yǎng)在血清使用中,常常會遇到各種問題,以下就一些常見問題進行解答。
1.保存血清什么辦法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2.怎樣避免出現(xiàn)沉淀物?
我們建議您在使用血清的時候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環(huán)境中
3.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
4.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管中,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
5.什么事熱滅活?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活性,而補體所參與的反應(yīng)有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。
細胞培養(yǎng)實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)過處理的血清對細胞生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低。
含量測定    *    100033-200406    對照品        50mg
含量測定    枸櫞酸氯米芬        對照品        100mg
含量測定    甲磺酸雙氫麥角毒堿    100035-199701    對照品        50mg
HPLC法含量測定    *    100037-200306    對照品        50mg
檢查    鄰甲苯磺酰胺    0038-9802    對照品        50mg
檢查    6-巰基嘌呤    0039-9601    對照品        50mg
HPLC法含量測定用    *    100041-200311    對照品        100mg
檢查    2-氯-4-硝基苯胺    100042-200002    對照品        50mg
檢查    *    100043-199701    對照品        50mg
含量測定    馬來酸*    100044-199712    對照品        50mg
細胞培養(yǎng)

 

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