當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光定量PCR
貨號:CP101060
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
脫水穿心蓮內(nèi)酯(標準品)Dehydroandrographolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 人降鈣素(CT)試劑盒 Human Calcitonin,CT ELISA Kit 人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯(標準品)Dehydroandrographolide succinate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品 Ratapelin12,AP12ELISAKit大鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬Apelin(APLN)試劑盒 Pig Apelin,APLN ELISA Kit
脫水羊藿素(標準品)Anhydroicaritin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 組蛋白H3-K79(mono/di/i)化檢測試劑盒10/20等 口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
脫氧野尻霉素(標準品)1-Deoxynojirimycin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Mouseai-IVIgGaibodyELISA試劑盒小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanpeptidoglycan,PGELISA試劑盒人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC))Hentriacontane質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC≥97.0%(GC) 組蛋白H3-K56(mono/di)化檢測試劑盒10/20等 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
二十六烷(分析標準品, ≥99.5% (GC))Hexacosane質(zhì)量規(guī)格:分析標準品, ≥99.5% (GC) MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISA試劑盒小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISA試劑盒人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,5-己二酮(standard for GC,≥99%(GC))2,5-Hexanedione質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99%(GC) 小鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)ELISA試劑盒 ,英文名: AchE ELISA Kit ELISAKitOT/BGP豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白規(guī)格:48T/96T
2,5-己二酮(分析標準品,≥99.5%(GC))2,5-Hexanedione質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC) 小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA檢測試劑盒Mouseierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 96T/48T HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒艱難梭菌(TCD-B)定性PCR法檢測試劑盒
諾如病毒(NV)定性RT-PCR法檢測試劑盒
鹿源性成分(Deer)定性PCR法檢測試劑盒
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。