當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次霍山石斛PCR試劑盒
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:霍山石斛PCR試劑盒
產品分類:熒光定量PCR
貨號:CP101054
產品規(guī)格:50次
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
脫氧核糖核酸酶 IIDNase II, from Pocine Pancreas質量規(guī)格:分子生物學級 Nasoniaviipennisvitellogenin,VtgELISA試劑盒蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(vtg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 絲酸/蘇酸蛋白激酶PAK4(PAK4)ELISA試劑盒 ,英文名: PAK4 ELISA Kit
5-硝基吲哚(>98.0%(GC))5-Nitroindole質量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 ,英文名: T4 ELISA Kit NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋁酞菁(>98.0%(T))Phthalocyanine Chloroaluminum質量規(guī)格:>98.0%(T) 大鼠合成酶(NOS)ELISA檢測試劑盒Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T GuineapigImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T))Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)質量規(guī)格:>98.0%(T) 人雌二醇受體(ER)試劑盒 Human Esadiol receptor,ER ELISA Kit Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人抗巨細胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三正丁基十四烷基氯化膦質量規(guī)格:50%gradeTributyltetradecylphosphonium chloride RabbitPlasminogen,PlgELISA試劑盒兔子纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠白介素3(IL-3)試劑盒 Rat Ierleukin 3,IL-3 ELISA KIT
羅漢果皂苷ⅢA1質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品mogroside ⅢA1 小鼠白介素13(IL-13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitfoGF-AlphaELISAKit大鼠轉化生長因子α規(guī)格:48T/96T
羅漢果皂苷ⅡA2質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品mogroside II A2 Rat nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 大鼠神經生長因子(NGF)ELISA試劑盒 人體(apolipoprotein)RFLP基因分析試劑盒20
遠華蟾蜍精(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Telocinobufagin HumanCrosslaps,CrELISAKit 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 ELISAKitAttacin人抗菌肽規(guī)格:48T/96T
霍山石斛PCR試劑盒炭疽桿菌(BA)定性PCR法檢測試劑盒
棘球蚴?。?/span>Ec)定性PCR法檢測試劑盒
錐蟲?。?/span>Tr)定性PCR法檢測試劑盒
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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