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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 50T海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-06-08 10:58:18瀏覽次數(shù):174次

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海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

?儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),產(chǎn)品僅用于科研請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品名稱

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱

Mycobacterium marinum

貨號(hào)

CP914593

 


相對(duì)定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡單
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中與*的兩種相對(duì)定量方法之一

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。

普伐他汀鈉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Pravastatin Sodium   :81131-70-6

鹽普莫卡因標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Pramoxine Hydrochloride  :637-58-1

氯磷定標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Pralidoxime Chloride   :51-15-0

紅車軸提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Red Clover Extract  :

水飛薊提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Milk Thistle Extract   :84604-20-6

卡瓦提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Kava Extract  :

生姜粉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Ginger  :

弗司可林粉末提取物標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Forskohlii Extract  :

刺五加粉末提取物標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Eleuthero Extract  :84696-12-5

牡荊樹提取物標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Chaste Tree Extract  :91722-47-3

纖維素粉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Cellulose (AS)  :9004-34-6

貓爪草提取物標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Cat’s Claw Extract  :289626-41-1

黑升麻提取物標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Black Cohosh Extract  :84776-26-1

越橘提取物標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Bilberry Extract  :

亞洲人參提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Powdered Asian Ginseng Extract   :50647-08-0

水蛭素(hirudin)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

凝血酶時(shí)間(TT)檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

凝血酶原時(shí)間(PT)檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間(ELT)檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)凝固法檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)比色法檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

纖維蛋白原凝結(jié)時(shí)間(FIB)Clauss法檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

酰胺水解活力(AMINOLYTIC)檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

纖維素分解活力(FIBRINOLYTIC)檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次

血栓溶解活力(THROMBOLYTIC)體外檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:20次
海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒4-Hydroxyriamrene 4-羥基氨苯蝶啶 規(guī)格:用于熒光標(biāo)記

4-HydroxyriamreneSulfa,SodiumSal 4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽 規(guī)格:用于熒光標(biāo)記

2,4-Diamino-6-phenyl-7-pridinol 2,4-二氨基-6--7-蝶啶 規(guī)格:用于總膳食纖維含量分析,DF-100A

racLafuidine 外消旋拉呋替丁 規(guī)格:雜質(zhì)檢查

Roxaidine 羅沙替丁 規(guī)格:雜質(zhì)檢查

PenicillinGprocaine 普魯卡因青霉素G 規(guī)格:粘度(1%,25℃)≥500mpa.s

PenicillinGbenzahinesal 芐星青霉素G 規(guī)格:粘度≥0.005pa.s

Isobuyl-d9Paraben 尼泊金異丁酯-d9 規(guī)格:粘度100000mPa.s

IsobuylParaben 尼泊金異丁酯 規(guī)格:粘度11250-21000mPas

IsopropylParaben 尼泊金異丙酯 規(guī)格:粘度20000~30000mpa.s

PenylParaben 戊基尼泊金 規(guī)格:粘度40~60mpa.s

Buyl-d9Paraben 尼泊金丁酯-d9 規(guī)格:粘度5500-6500mpa.s

Ehyl-d5Paraben 尼泊金乙酯-d5 規(guī)格:粘度55-60mPa.s

MehylParaben-d4 尼泊金甲酯-d4 規(guī)格:粘度K4m,4000mpa.s

BenzylParaben 尼泊金芐酯 規(guī)格:植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

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