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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-20 16:30:16瀏覽次數(shù):206次

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產(chǎn)品名稱(chēng)英文名稱(chēng)包裝
Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)Cell lysis buffer for Western and IP可根據(jù)客戶要求訂制

Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 
Western及IP細(xì)胞裂解液(Cell lysis buffer for Western and IP),是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞的裂解液。本細(xì)胞裂解液裂解的細(xì)胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。Western及IP細(xì)胞裂解液的主要成分為20mMTris (pH7.5),150mMNaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多種抑制劑??梢杂行б种频鞍椎慕到?,并維持原有的蛋白間相互作用。用Western及IP細(xì)胞裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度。
由于含有較高濃度的Triton X-100等干擾物質(zhì),不能用Bradford法測(cè)定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。 
保存條件: 
-20℃保存,一年有效。 
注意事項(xiàng): 
為取得的使用效果,盡量避免過(guò)多的反復(fù)凍融??梢赃m當(dāng)分裝后使用。 
需自備PMSF。
使用說(shuō)明: 
對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品: 
1. 融解Western及IP細(xì)胞裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的Z終濃度為1mM。 
2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 
對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。大團(tuán)的細(xì)胞較難裂解充分,而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸,相對(duì)比較容易裂解充分。 
3. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 
裂解液用量說(shuō)明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入100微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到150微升或200微升。 
Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)對(duì)于組織樣品: 
1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。 
2. 融解Western及IP細(xì)胞裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的Z終濃度為1mM。 
3. 按照每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。) 
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。 
5. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分
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Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)收貨注意事項(xiàng):
當(dāng)您收到貨物后,請(qǐng)仔細(xì)檢查產(chǎn)品的名稱(chēng)、數(shù)量、質(zhì)量規(guī)格是否與您訂購(gòu)產(chǎn)品*。若產(chǎn)生異議,請(qǐng)及時(shí)與我司。按照我司指令及時(shí)將貨物退回,我司*時(shí)間為您安排配送正確貨物。請(qǐng)您務(wù)必保證退還貨物的包裝完整性。
當(dāng)您收到貨物后,若發(fā)現(xiàn)包裝破損,產(chǎn)品泄露等意外情況,請(qǐng)及時(shí)拍照留證,并將照片傳回我司,我司確認(rèn)后,將及時(shí)為您更換新的貨物,原有貨物按照我司指令處理。
 因大多情況貨物是以快遞形式配送,請(qǐng)盡量本人簽收,如由您認(rèn)同的其他人或第三方代為簽收,也認(rèn)同與您本人簽收具有相同的效力,如24小時(shí)內(nèi)無(wú)反饋,默認(rèn)貨物完整正確送達(dá)。
我司所有產(chǎn)品的質(zhì)量追溯期為90天,若有質(zhì)量異議,請(qǐng)務(wù)必在90天內(nèi)提出,超過(guò)90天后,我司默認(rèn)貴處已經(jīng)認(rèn)同該產(chǎn)品的質(zhì)量。
 我司默認(rèn)貨物簽收24小時(shí)內(nèi)無(wú)反饋,即視為您已經(jīng)認(rèn)同我司到貨情況,未出現(xiàn)包裝破損、貨物錯(cuò)誤等問(wèn)題。
Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)分子生物學(xué)領(lǐng)域:
涉及核酸純化、常用分子生物學(xué)試劑、PCR等相關(guān)試劑盒。
分子生物學(xué)試劑:擁有的價(jià)格優(yōu)勢(shì),品質(zhì)可信賴(lài),市場(chǎng)占比龐大。
1ml    瓶    蛋白酶 K溶液(10mg/ml)
5×1ml    瓶    蛋白酶 K溶液(10mg/ml)100mg    瓶    Proteinase K 蛋白酶 K(原裝)
100mg    瓶    Proteinase K 蛋白酶 K(原裝)
100mg    瓶    Proteinase K 蛋白酶 K
1g    瓶    Proteinase K 蛋白酶 K
1ml    瓶    RNase A溶液 (10mg/ml)
25mg    瓶    RNase A (牛胰)
25mg    瓶    RNase A
1ml    瓶    核酸助沉劑
5×1ml    瓶    核酸助沉劑
250ml    瓶    Tris
100ml    瓶    TE 緩沖液(PH=8.0)
500ml    瓶    TE 緩沖液(PH=8.0)
250ml    瓶    水
        D N A 電泳
0.5ml    支    10000×Solargel Green
0.5ml    支    10000×Solargel Red
100ml    瓶    40%丙烯酰胺(19:1)
500ml    瓶    40%丙烯酰胺(19:1)

中文名稱(chēng)  Patched/PTCH抗體 
別    名  PTC1; A230106A15Rik; BCNS; FLJ26746; FLJ42602; Holoprosencephaly 7; HPE7; mes; NBCCS; OTTHUMP00000021709; OTTHUMP00000021710; Patched; Patched (Drosophila) homolog; Patched 1; Patched homolog (Drosophila); Patched homolog 1 (Drosophila); Patched homolog 1; Patched protein homolog 1; PTC; PTC1; PTCH; PTCH protein +12b; PTCH protein +4'; PTCH protein -10; PTCH protein; PTCH1; PTCH1 protein; PTCH11; Ptch2.  
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg 
抗體來(lái)源  Rabbit  
克隆類(lèi)型  polyclonal 
交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit 
產(chǎn)品類(lèi)型  一抗    
Western及IP細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明書(shū)研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  
蛋白分子量  predicted molecular weight: 161kDa 
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human 

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