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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞操作

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞操作

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-20 15:51:40瀏覽次數(shù):183次

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大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞操作收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞【Rat Heart: Normal Aortic Smooth Muscle Cells 產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞操作

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963916

收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lipase人脂肪酶規(guī)格:48T/96T 硫酸軟骨素 HPLC98% 20mg

LMP-1人潛伏膜蛋白1規(guī)格:48T/96T 硫酸小檗堿 HPLC98% 20mg

LPL人脂蛋白脂酶規(guī)格:48T/96T 硫辛酸 HPLC98% 20mg

Lp-PL-A2人脂蛋脂酶A2規(guī)格:48T/96T 柳穿魚黃素 HPLC98% 20mg

LPS人脂多糖/內(nèi)規(guī)格:48T/96T 龍膽苦苷 HPLC98% 20mg

Lp-α人脂蛋白α規(guī)格:48T/96T 龍膽山酮酚 HPLC98% 10mg

LTA人脂0壁酸規(guī)格:48T/96T 龍膽酸 HPLC98% 20mg

LTBP2人組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2規(guī)格:48T/96T 龍血素A HPLC98% 20mg

LXA4人脂氧素A4規(guī)格:48T/96T 龍血素B HPLC98% 20mg

MAP-2人微管相關(guān)蛋白2規(guī)格:48T/96T 龍血素C HPLC98% 20mg
大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)試劑盒 Rat Tenascin-C,TN-C ELISA Kit 明膠  Gelatin  質(zhì)量規(guī)格:藥用級,膠強(qiáng)度 ~240 g Bloom

英文名稱HumanCTX-IELISAKitI型膠原C端肽規(guī)格:96T/48T Bacto酵母浸粉(BD原裝)  Yeast extract  質(zhì)量規(guī)格:Bacto;BD212750

動物組織同還原酶1E(aldo-ketoreductase1E)活性比色法定量檢測試劑盒20 無水碳酸鈉   carbonate anhydrous  質(zhì)量規(guī)格:AR,99.8%

ELISAKitLebtospira兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格:48T/96T D-果糖  D-Fructose  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

小鼠葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒 ,英文名: GPI ELISA Kit 核黃素鈉水合物  Riboflavin 5'-monophosphate  salt hydrate  質(zhì)量規(guī)格:核黃素73.0 ~79.0%

人合成酶(NOS)ELISA檢測試劑盒Humanniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T 化乙錠溶液,10 mg/ml  EB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒 Rat mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit 核苷酸膠體染料  Green-DNA Dye,SYBR Green I  質(zhì)量規(guī)格:BR

英文名稱Humangp130solublefragmeELISAKITgp130規(guī)格:96T/48T D-葡萄糖無水  D-Glucose  質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,分子生物學(xué)級

動物組織石蠟切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(lán)(ALCIANBLUE)染色試劑盒50 咪唑  Imidazole  質(zhì)量規(guī)格:AR

ELISAKitCA兔兒茶酚胺規(guī)格:48T/96T L(+)-阿拉伯糖  L(+)-Arabinose  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞操作大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒 Rat neuophil elastase,NE ELISA Kit 硫酸氫氯吡格雷 II(標(biāo)準(zhǔn)品)  Clopidogrel Bisulfate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA檢測試劑盒Ratneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit 96T/48T 硫酸氫氯吡格雷 II  Clopidogrel Bisulfate  質(zhì)量規(guī)格:含量97.0%-101.5%,II

大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)試劑盒 Rat neuophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 硫酸羥氯喹(標(biāo)準(zhǔn)品)  Hydroxychloroquine sulfate  質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查

大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA檢測試劑盒Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISAKit 96T/48T 硫酸羥基氯喹  Hydroxychloroquine Sulfate  質(zhì)量規(guī)格:>98%

大鼠中性粒細(xì)胞趨化因子(CINC)試劑盒 Rat cytokine-induced neuophil chemoatacta,CINC ELISA Kit 硫酸鉛(>99%,BC)  Lead (II) sulfate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC

大鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)試劑盒 Rat Cyclin Depende Kinase 5,CDK5 ELISA Kit 硫酸普拉鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dehydroepiandrosterone-3-sulfate  質(zhì)量規(guī)格:含量測定

大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)試劑盒 Rat Perilipin-1,Plin1/Peri/Plin ELISA kit 硫酸奈替米星(標(biāo)準(zhǔn)品)  Netilmicin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格:含量測定

大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)試劑盒 Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit 硫酸奈替米星  Netilmicin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格:≥595 µg/mg,BR

大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/AgB/H-1)ELISA檢測試劑盒Ratmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/AgB/H-1ELISAKit 96T/48T 硫酸鈉十水(>99%,BC)   sulfate, decahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒 Rat ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 硫酸錳一水(AR)  Manganous sulfate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。

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