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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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人肺MatchPair™鑒定試劑盒操作

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-18 16:13:00瀏覽次數(shù):138次

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人肺MatchPair™鑒定試劑盒操作收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

人肺MatchPair™鑒定試劑盒操作

規(guī)格

T25m2

貨號(hào)

CS-963692

收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

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實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4
.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
7376-90-1  Ac-Phe-NH2  5g  Fructus bruceae鴉膽子探針法PCR鑒定試劑盒 

7376-90-1  Ac-Phe-NH2  25g  Sanguis draxonis血竭探針法PCR鑒定試劑盒 

104809-29-2  H-Nle-Arg-Phe-NH2  25mg  Sanguis draxonis血竭探針法PCR鑒定試劑盒 

104809-29-2  H-Nle-Arg-Phe-NH2  100mg  Radix scrophulariae玄參探針法PCR鑒定試劑盒 

7729-20-6  (H-Cys-Gly-OH)2  250mg  Radix scrophulariae玄參探針法PCR鑒定試劑盒
3-Amino-5-phenylpyrazole  1572-10-7  中文名:3-氨基-5-苯基吡唑  分子式:C9H9N3  度:98.0%      小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  16691-43-3  中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式:C2H4N4S  度:98.0%      小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-Amino-4-methylbenzamide  19406-86-1  中文名:3-氨基-4-甲酰胺  分子式:C8H10N2O  度:98.0%      小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-Amino-4-hydroxybenzoic acid  1571-72-8  中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸  分子式:C7H7NO3  度:98.0%      小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-Amino-3-phenylpropionic acid  614-19-7  中文名:C9H11NO2  分子式:C9H11NO2  度:98.0%      小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
人肺MatchPair™鑒定試劑盒操作1020315-31-4  PF-04457845  50mg  Flos albiziae合歡花染料法PCR鑒定試劑盒 

1020315-31-4  PF-04457845  5mg  Semen juglandis核桃仁染料法PCR鑒定試劑盒 

102036-28-2  Protosappanin A  5mg  Flos albiziae合歡花染料法PCR鑒定試劑盒 

1020399-49-8  CARM1-IN-1  10mg  Sargassum海藻染料法PCR鑒定試劑盒 

1020399-49-8  CARM1-IN-1  10mM*1mLinDMSO  Sargassum海藻染料法PCR鑒定試劑盒
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。

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