當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠腸巨噬細(xì)胞操作
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠腸巨噬細(xì)胞操作 | T25m2 | CS-963908 |
大鼠腸巨噬細(xì)胞【Rat Intestinal:Intestinal Macrophages】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA檢測試劑盒RatVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspin 96T/48T 6-葡萄糖三鈉鹽 D-Gluconate 6-phosphate 3 salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit 硫唑嘌呤 Azathioprine 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠內(nèi)脂素(visfatin)試劑盒 Rat visfatin ELISA Kit 鹽酸巴尼地平 Barnidipine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA檢測試劑盒Ratvisfatin 96T/48T 鹽酸頭孢吡肟 Cefepime 質(zhì)量規(guī)格:含量82.5%~91.1%(每毫克頭孢吡肟含量,干品)
大鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA檢測試劑盒Ratadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1A 96T/48T 鹽酸頭孢吡肟 (標(biāo)準(zhǔn)品) Cefepime 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
大鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒 Rat adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA Kit 洛索洛芬鈉 Loxoprofen 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%(按照干品計算)
大鼠黏多糖/糖胺聚糖試劑盒 Rat glycosaminoglycan/mucopolysaccharide ELISA kit 洛索洛芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Loxoprofen 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
大鼠黏著斑蛋白(VCL)試劑盒 Rat Vinculin,VCL ELISA kit 丹皮酚 Paeonol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
大鼠鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)試劑盒 Rat ornithine carbamoyl ansferase,OCT ELISA Kit 丹皮酚(標(biāo)準(zhǔn)品) Paeonol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠尿苷二0酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1)試劑盒 Rat UDP-glucumno-sylansferase 1,UGT1 ELISA Kit 羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀 Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
小鼠前列環(huán)素(PGI2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGI2 ELISA Kit 苯甲酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) benzoylpaeoniflorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 96T/48T 3,4,5-三咖啡??鼘幩?/span>(標(biāo)準(zhǔn)品) 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)試劑盒 Human secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI ELISA Kit 澤瀉醇A醋酸酯 Alisol A 24-acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatIerleukin9,IL-9ELISAKit大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 澤瀉醇C-23-醋酸酯;澤瀉醇C單乙酸酯 Alisol C monoacetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CDK4蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25 香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Sclareolide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseMelatonin,MTELISA試劑盒小鼠褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 香紫蘇內(nèi)酯 Sclareolide 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,BR
小鼠前膠原C端蛋白酶增強(qiáng)子1(E1)ELISA試劑盒 ,英文名: E1 ELISA Kit 桃葉珊瑚苷 Aucubin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminA,VAELISAKit 96T/48T 甲硝唑 Metronidazole 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)試劑盒 Rat RAES ELISA kit 甲硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Metronidazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanPICPELISAKit人I型前膠原羧基端肽(PICP)規(guī)格:96T/48T 乙酰哈巴苷 8-O-Acetylharpagide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腸巨噬細(xì)胞操作大鼠乙酰膽堿(Ach)試劑盒 Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit 龍膽山酮酚 HPLC≥98% 10mg
大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T 龍膽苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Gentiopicroside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Rat acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit 龍膽苦苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)試劑盒 Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit 龍膽黃堿 HPLC≥95% 20mg
大鼠乙酰輔酶A 試劑盒 Rat acetyl-CoA ELISA Kit 龍膽二糖 Gentiobiose 質(zhì)量規(guī)格:>96%,
大鼠乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)試劑盒 Rat Acetyl-CoA Carboxylase Syhetase,ACC ELISA Kit 六氫姜黃素 HPLC≥98% 5mg
大鼠異檸檬酸脫氫酶(ICD)試劑盒 Rat isociate dehydrogenase,ICD ELISA Kit 六偏鈉 hexametaphosphate 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,Tech Grade
大鼠抑瘤素M(OSM)試劑盒 Rat oncostatin M,OSM ELISA kit 六價鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水) Chromium Standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水
大鼠抑瘤素M受體(OSMR)試劑盒 Rat Oncostatin-M-specific receptor subunit beta,OSMR ELISA kit 六甲蜜胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Altretamine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
大鼠抑胃肽(GIP)試劑盒 Rat gasic inhibitory polypeptide,Gip ELISA kit 六磷酰三胺(>98%,BR) HMPA, hexamethylphosphoramide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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