當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠腎小管上皮細(xì)胞說明
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠腎小管上皮細(xì)胞說明 | T25m2 | CS-963895 |
大鼠腎小管上皮細(xì)胞【Rat Tubular: Normal Tubular Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA檢測試劑盒HumanElastase 96T/48T 透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量10K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000
人彈性蛋白酶(Elastase)試劑盒 Human Elastase ELISA Kit 透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量90K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000
人彈性蛋白酶2,中性粒細(xì)胞(ELA2)試劑盒 Human ELA2 ELISA KIT 透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量4K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:4000
人蛋氨酸-R-亞砜還原酶 B2,線粒體(MSRB2/CBS-1/MSRB/CGI-131)試劑盒 Human MSRB2 ELISA kit 羅哌卡因 Ropivacaine base 質(zhì)量規(guī)格:>98%
人蛋白 DJ-1(PARK7)試劑盒 Human Protein DJ-1,PARK7 ELISA kit 羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品) Ropivacaine base 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人蛋白(肽酰脯氨酰順/反異構(gòu)酶)NIMA結(jié)合1(PIN1)試劑盒 Human PIN1 ELISA Kit 醋酸棉酚 Gossypol-acetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.5%,BR
人蛋白ATP1B4(ATP1B4)試劑盒 Human ATP1B4 ELISA Kit 過氧化氫酶(牛肝臟) Catalase 質(zhì)量規(guī)格:2,000-5,000 units/mg,進(jìn)分
人蛋白C(PC)試劑盒 Human Protein C ELISA Kit 他唑巴坦,他唑巴坦酸 Tazobactam Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人蛋白C(ProteinC)ELISA檢測試劑盒HumanProteinC 96T/48T 他唑巴坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Tazobactam Acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
人蛋白S(Protein S)試劑盒 Human Protein S ELISA Kit NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物 β-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate(β-NAD) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)試劑盒 Human CAMK 2 ELISA Kit 醋酸卡泊芬凈 Caspofungin Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
RatIerleukin18,IL-18ELISAKit大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 質(zhì)量規(guī)格:0.8%內(nèi)酯含量,BR
PASE-7蛋白共沉淀分析試劑盒5 小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 質(zhì)量規(guī)格:>98%標(biāo)準(zhǔn)品
MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 利扎曲坦 Rizatriptan 質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠羥戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)ELISA試劑盒 ,英文名: HMG-CoAR ELISA Kit 地瑞那韋乙醇鹽 Darunavir Ethanolate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠球蛋白M(IgM)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulinM,IgMELISAKit 96T/48T 維拉佐酮 Vilazodone 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
人富組蛋白(histatin-5)試劑盒 Human histatin 5 ELISA Kit 達(dá)比加群 Dabigatran 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatIerleukin1α,IL-1αELISAKit大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞格列奈 Repaglinide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
PASE-8蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25 瑞格列奈(標(biāo)準(zhǔn)品) Repaglinide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
MouseMacrophageInflammatoryProtein1δ,MIP-1δELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T D-阿拉伯糖 D-(-)-Arabinose 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠腎小管上皮細(xì)胞說明大鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)試劑盒 Rat angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA kit 洛匹那韋代謝產(chǎn)物M-1 Lopinavir Metabolite M-1 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 96T/48T 洛匹那韋-d8 Lopinavir-d8 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒 Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit 洛匹那韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Lopinavir 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T 洛匹那韋 Lopinavir 質(zhì)量規(guī)格:>99%
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 洛莫司?。?biāo)準(zhǔn)品) Lomustine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)抗體試劑盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit 洛莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Lomustine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)試劑盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit 洛莫司汀 HPLC≥98% 100mg
大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA檢測試劑盒Ratangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T 洛莫司汀 Lomustine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒 Rat angiotensinogen,aGT ELISA Kit 洛美沙星天冬氨酸鹽 Lomefloxacin, Aspartate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T 洛柯堿 HPLC≥98% 5mg
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
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