大鼠食管上皮細(xì)胞【Rat Esophagus: Normal Esophageal Epithelial Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
英文名稱HumanPlasminogenactivator,urokinasereceptor人尿激酶型血漿酶原激活因子受體((PLAUR,uPAR))規(guī)格：96T/48T 咪康唑  Miconazole  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanPlatelet-DerivedGrowthFactor人血小板源性生長因子(PDGF-AB)規(guī)格：96T/48T 麥迪霉素  Midecamycin  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptor，PDGFsRα人血小板源性生長因子可溶性受體α(PDGFsRα)規(guī)格：96T/48T 米諾地爾葡萄糖苷酸  Minoxidil Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanPlateletFactor4人血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 嗎替麥考酚酯-d4  Mycophenolate Mofetil-d4  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanPPAR-γ人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)規(guī)格：96T/48T 麥考酚酯(環(huán)氧樹脂雜質(zhì)E)  Methyl Mycophenolate (EP Impurity E)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱Humanpregnancyassociatedplasmaprotein-A人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 嗎替麥考酚酯N-氧基(環(huán)氧樹脂雜質(zhì)G)  Mycophenolate Mofetil N-Oxide (EP Impurity G)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanPro-ANP(1-98)人心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格：96T/48T 奈替米星  Netilmicin  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanProgesterone人孕激素(Progesterone)規(guī)格：96T/48T 制霉菌素  Nystatin  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanProinsulin人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 奧氮平內(nèi)酰胺雜質(zhì)  Olanzapine Lactam Impurity  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

英文名稱HumanPSA人前列腺特異性抗原(PSA)規(guī)格：96T/48T 奧氮平硫代內(nèi)酰胺雜質(zhì)  Olanzapine Thiolactam Impurity  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小鼠染色質(zhì)裝配因子1亞基B(CHAF1B)ELISA試劑盒 ，英文名： CHAF1B ELISA Kit 馬來酸曲美布?。?biāo)準(zhǔn)品）  Trimebutine maleate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit 96T/48T 肝素鈉/肝磷脂鈉鹽  Heparin   質(zhì)量規(guī)格：細(xì)胞培養(yǎng)級，效價≥180IU/mg

大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)試劑盒 Rat Perilipin-1,Plin1/Peri/Plin ELISA kit -β-環(huán)糊精  HE-β-CD  質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%,藥用級

英文名稱HumanIL-11ELISAKit人白介素-11(IL-11)規(guī)格：96T/48T 奈福泮/鹽酸平痛新  Nefopam HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,CP

動物直腸組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 甲氨蝶呤二鈉鹽   Methotrexate di   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甲氨蝶呤二鈉鹽 (標(biāo)準(zhǔn)品)  Methotrexate di   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠染色質(zhì)域解旋酶DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)ELISA試劑盒 ，英文名： CHD4 ELISA Kit 鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星  Sarafloxacin HCl  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T 鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sarafloxacin HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)試劑盒 Rat Cyclin Depende Kinase 5,CDK5 ELISA Kit 甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽  Diphemanil mesylate  質(zhì)量規(guī)格：>98%

英文名稱HumanIL-10ELISAKIT人白介素10(IL-10)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T 甲硫二苯馬尼(標(biāo)準(zhǔn)品)  Diphemanil mesylate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠食管上皮細(xì)胞說明大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)試劑盒 Rat Eotaxin 1,Eotaxin 1/CCL11/ECF ELISA Kit 馬桑寧內(nèi)酯 HPLC≥98% 5mg

大鼠嗜酸性粒細(xì)胞過氧化物酶(EPO)試劑盒 Rat Eosinophil Peroxidase,EPO ELISA Kit 馬賽替尼  Masitinib  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)試劑盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 馬錢苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品）  Loganic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠瘦素(LEP)試劑盒 Rat Leptin,LEP ELISA kit 馬錢苷酸 HPLC≥98% 20mg

大鼠雙氫(DHT)ELISA檢測試劑盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T 馬錢苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Loganin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠雙氫(DHT)試劑盒 Rat Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 馬錢苷 HPLC≥98% 20mg

大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T 馬尿酸鈉(>98%,BR)   hippurate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit 馬尿酸  Hippuric acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T 馬來(>98%，植物激素級)  MH, maleic hydrazide  質(zhì)量規(guī)格：>98%，植物激素級

大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit 馬來酸依那普利（標(biāo)準(zhǔn)品）  Enalapril Maleate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。