我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

大鼠滑膜細(xì)胞【Rat Bone Joint: Normal Synovial Cell】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)人肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒 Human Myoglobin ELISA Kit 枸櫞酸氯米芬,克羅米芬  Clomiphene   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaenascin-R,TN-R 96T/48T ML-176;SR-3335  SR3335;ML176  質(zhì)量規(guī)格：>98%

人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒 Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit Semaxanib(SU-5416 )  SU5416   質(zhì)量規(guī)格：>98%,VEGFR(Flk-1/KDR)抑制劑

人肌聯(lián)蛋白(TTN)抗體試劑盒 Human ai-titin (TTN)aibody ELISA kit 米爾貝肟  Milbemycin oxime  質(zhì)量規(guī)格：A3+A4>97%

人肌強(qiáng)直蛋白蛋白激酶(DMPK)試劑盒 Human Myotonin-protein kinase,DMPK ELISA kit 伐地考昔  Valdecoxib  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人肌球蛋白(Myosin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanMyosin 96T/48T 胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素  Gastrin I,human   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人肌球蛋白(MYS)試劑盒 Human Myosin,MYS ELISA Kit UDPGA Na；尿苷-5'-二葡糖醛酸三鈉鹽  Uridine 5'-diphosphoglucuronic acid tri salt  質(zhì)量規(guī)格：≥98%；美國(guó)進(jìn)口

人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanMyosinlightChain,MLC 96T/48T 替卡西林,替卡西林二鈉  Ticarcillin di salt  質(zhì)量規(guī)格：BR,二鈉鹽

人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)試劑盒 Human myosin light chain kinase,MLCK ELISA Kit 替卡西林(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ticarcillin di salt  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定，二鈉鹽

人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmyosinheavychain,MHC 96T/48T RGD肽  Arg-Gly-Asp   質(zhì)量規(guī)格：>97%,integrin抑制劑
人甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽1(C4/C2 RA反應(yīng)因子的激活因子)(MASP1)試劑盒 Human MASP1 ELISA Kit 利拉萘酯  Liranaftate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

RatInhibin,INH-AELISAKit大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 利拉萘酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Liranaftate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖NBT顯色檢測(cè)試劑盒10/20 萘普生鈉  Naproxen   質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR

Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 萘普生鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Naproxen   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 ，英文名： ENA-78/CXCL5 ELISA Kit 齊多夫定  Zidovudine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP34,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 96T/48T 齊多夫定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Zidovudine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人甘膽酸(CG)試劑盒 Human cholyglycine,CG ELISA Kit 尼可地爾  Nicorandil  質(zhì)量規(guī)格：>98.5(C8H9N3O4干品),BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

RatinhibitorysubunitofNF-κBα,IKBαELISAKit大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 尼可地爾（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nicorandil  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 煙酸  Nicotinic acid  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Mousekeyholelimpethemocyanin,KLHELISA試劑盒小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 利福平；利發(fā)霉素  Rifampicin  質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠滑膜細(xì)胞說明大鼠尿激酶(UK)ELISA檢測(cè)試劑盒Raturokinase,UKELISAKit 96T/48T 咪唑立賓鹽酸鹽  Mizoribine Hydrobromide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠尿激酶(UK)試劑盒 Rat urokinase,UK ELISA Kit 咪唑立賓  Mizoribine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 Rat urokinase plasminogen activator,uPA ELISA kit 咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品）  Imidazole  質(zhì)量規(guī)格：檢查

大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 Rat Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit 咪唑  Imidazole  質(zhì)量規(guī)格：AR

大鼠尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)試劑盒 Rat urease related protein C,UreC ELISA Kit 咪喹莫特（標(biāo)準(zhǔn)品）  Imiquimod  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠尿微量白蛋白(MAU/ALB)試劑盒 Rat microalbunminuria,MAU/ALB ELISA kit 咪喹莫特  Imiquimod  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

大鼠尿液三葉因子3(TFF-3)試劑盒 Rat urinary efoil factor 3,TFF-3 ELISA kit 咪康唑  Miconazole  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠檸檬酸合酶(CS)試劑盒 Rat Ciate syhase,CS ELISA Kit 咪草煙  Imazethapyr  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠凝聚素(CLU)試劑盒 Rat Clusterin,CLU ELISA Kit 孟魯司特亞砜(非對(duì)映)  Montelukast Sulfoxide(Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGelsolinELISAKit 96T/48T 孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Montelukast   質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。