當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2小鼠脈絡膜血管細胞說明
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠脈絡膜血管細胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963847 |
小鼠脈絡膜血管細胞【Mouse Choroid: Normal Choroidal Vascular Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 ,英文名: STK ELISA Kit 5-羥色胺鹽酸鹽(標準品) Serotonin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 月見草油(標準品) Evening primrose oil 質(zhì)量規(guī)格:鑒別
小鼠絲酸轉(zhuǎn)肽酶抑制劑Kazal type 3(SPINK3)ELISA試劑盒 ,英文名: SPINK3 ELISA Kit 龍血素A(標準品) Loureirin A 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠斯鈣素1(STC1)ELISA試劑盒 ,英文名: STC1 ELISA Kit 木栓酮(標準品) FRIEDELIN 質(zhì)量規(guī)格:鑒別
小鼠死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK1 ELISA Kit 表木栓醇(標準品) FRIEDELAN-3BETA-OL 質(zhì)量規(guī)格:鑒別
小鼠死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK3 ELISA Kit 老龍皮酸;網(wǎng)脊衣酸 A(標準品) (4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid 質(zhì)量規(guī)格:鑒別用
小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)ELISA試劑盒 ,英文名: TSPAN30 ELISA Kit 焦性沒食子酸(標準品) Pyrogallol 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠松弛肽(RLN)ELISA試劑盒 ,英文名: RLN ELISA Kit 正十九烷(標準品) N-NONADECANE 質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標
小鼠速激肽受體1(TACR1)ELISA試劑盒 ,英文名: TACR1 ELISA Kit 正十五烷(標準品) N-PENTADECANE 質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標
小鼠速激肽受體2(TACR2)ELISA試劑盒 ,英文名: TACR2 ELISA Kit 咖啡酸乙酯(標準品) ETHYL CAFFEATE 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人肝脂酶(HL)試劑盒 Human hepatic lipase,HL ELISA Kit 甲地孕酮 Megestrol base 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲地孕酮(標準品) Megestrol base 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
BJ5183細菌1毫升 3-縮酮 Estradiene dione-3-keta 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Mouseierleukin10,IL-10ELISA試劑盒小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 索拉非尼 Sorafenib base 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
小鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒 ,英文名: Renin ELISA Kit 二組胺;組胺 Histamine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR
小鼠生長因子(GH)ELISA檢測試劑盒Mousegrowthhormone,GHELISAKIT 96T/48T 氯喹,氯喹二鹽 Chloroquine diphosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
人肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)試劑盒 Human L-FABP ELISA Kit (-)-莨菪堿,L-天仙子胺,L-天仙子堿 (-)-Hyoscyamine 質(zhì)量規(guī)格:>99%
Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (-)-莨菪堿,L-天仙子胺,澳洲毒茄堿(標準品) (-)-Hyoscyamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
BJ5183細菌1毫升 葡聚糖D70/右旋糖苷 Dextran D70 質(zhì)量規(guī)格:Mw:63000~77000,USP32
MouseIerleukin11,IL-11ELISA試劑盒小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 右旋糖苷/葡聚糖D40 Dextran D40 質(zhì)量規(guī)格:Mw35 000 to 45 000
小鼠脈絡膜血管細胞說明大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測試劑盒RatAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T 木犀草素(標準品) Luteolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠抗胰蛋白酶(AT)試劑盒 Rat Ai-ypsin,AT ELISA Kit 木犀草素 HPLC≥98% 20mg
大鼠抗增殖細胞核抗原(PCNA)抗體試劑盒 Rat proliferating cell nuclear aigen(PCNA)aibody ELISA kit 木犀草素 Luteolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
大鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測試劑盒Ratproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T 木犀草苷(標準品) Cynaroside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA檢測試劑盒Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit 96T/48T 木犀草苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒 Rat ai-cenol and cenosome aibody,ACA ELISA Kit 木通苯乙醇苷B HPLC≥98% 20mg
大鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測試劑盒RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T 木通苯乙醇苷B HPLC≥98% 10mg
大鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)試劑盒 Rat Perinuclear ai-neuophil cytoplasmic aibody,pANCA ELISA Kit 木糖基紫杉醇 HPLC≥98% 20mg
大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T 木糖苷脫乙?;仙即?/span> HPLC≥40% 20mg
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測試劑盒RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 96T/48T 木糖苷兒茶酚 HPLC≥98% 5mg
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