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小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞【Mouse Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963797 |
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基癸烯酸 HPLC≥98% 20mg
Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISA試劑盒小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基攀援山橙堿 HPLC≥98% 20mg
MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISA試劑盒小鼠脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基喜樹堿 HPLC≥98% 20mg
MouseCA724ELISA試劑盒小鼠標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去乙酰紫杉醇;表去乙?;仙即?/span> HPLC≥98% 20mg
MouseCalcitonin,CTELISA試劑盒小鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 脫乙酰巴卡亭 HPLC≥98% 20mg
Mousecalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O羅漢果苷V HPLC≥98% 20mg
Mousecalciumchannelblockers,CCBELISA試劑盒小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基柳杉酚 HPLC≥98% 5mg
MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISA試劑盒小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羰基Β乙酰乳香酸 HPLC≥98% 20mg
MouseCalretinin,CRELISA試劑盒小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 酮基乳香酸 HPLC≥98% 5mg
Mousecarbonicanhydrase,CAELISA試劑盒小鼠酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去羥基印烏堿 HPLC≥98% 20mg
MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸頭孢匹羅 Cefpirome Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>760μg/MG,BR
小鼠胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 ,英文名: PL ELISA Kit 硫酸頭孢匹羅(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefpirome Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISAkit 96T/48T 阿米舒必利 Amisulpride 質(zhì)量規(guī)格:含量≥900μg/mg,度大于99%,USP32
人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶TT(GSTπ)試劑盒 Human Glathione S-ansferase TT,GSTπ ELISA Kit 阿米舒必利(標(biāo)準(zhǔn)品) Amisulpride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 非諾貝特酸 Fenofibric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
APC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 非諾貝特酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenofibric acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸莫西沙星 Moxifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠胎盤鈣黏蛋白(CDHP)ELISA試劑盒 ,英文名: CDHP ELISA Kit 鹽酸莫西沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Moxifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T 昔美酸沙美特羅 Salmeterol xinafoate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
??谔阋?/span>(FMDV)抗體(IgM)試劑盒 Bovine aibody against Foot and Moh Disease(FMDV)IgM ELISA Kit 萘普生 Naproxen 質(zhì)量規(guī)格:>99%以上,S-構(gòu)型無(wú)結(jié)晶水
小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞直銷TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測(cè)試劑盒(含HRP二抗)20 羥丙基纖維素(粘度11250-21000mPas) Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M 質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas
The formation of red blood cells of rat prolactin receptor (EPOR) ELISA Kit 大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 羥丙基纖維素(4000mpas) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度K4m,4000 mpa.s
The human aimicrobial peptide (Attacin) ELISA Kit 人抗菌肽(Attacin)ELISA試劑盒 羥丙基纖維素(30000 mpa.s) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR
The human influenza virus aibody IgG (FLU) ELISA Kit 人流感病毒抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒 羥丙基纖維素 Hydroxypropylmethylcellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s
The rat cellar protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒 羥丙基β環(huán)糊精;2-羥丙基-β-環(huán)糊精 HPCD 質(zhì)量規(guī)格:>98%,藥用級(jí)
Three iodothyronine (T3) ELISA Kit 人狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 羥苯磺酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium dobesilate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
Thrombin receptor (A) ELISA Kit 大鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒 薔薇酸,'野鴉椿酸 HPLC≥98% 5mg
UlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 強(qiáng)力霉素鹽酸鹽 Doxycycline 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
UlexEuropaeusagglinin,UEAELISA試劑盒荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 強(qiáng)力霉素堿/強(qiáng)力霉素一水合物 Doxycycline monohydrate/Doxycycline base 質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Very low density lipoprotein receptor (VLDLR) ELISA Kit 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒 強(qiáng)力霉素磺基水楊酸 Doxycycline ssa 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞直銷5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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