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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說明
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963787 |
小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Mouse Lung: Normal Artery Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Rat soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒 木糖苷兒茶酚 HPLC≥98% 5mg
Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 羥基豨薟精醇 HPLC≥98% 5mg
Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒 氧代beta谷甾醇 HPLC≥98% 5mg
Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 氧代扁柏脂素 HPLC≥98% 5mg
Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 乙酸,二羥基雙氫黃酮酯 HPLC≥98% 5mg
Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒 異戊烯氧基gamma花椒堿 HPLC≥98% 5mg
Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒 (),異海松二烯,二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 羥基蓽澄茄烯酮 HPLC≥98% 5mg
Rat terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 Alfa鐵杉脂素 HPLC≥98% 5mg
Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠(T)ELISA試劑盒 Alpha菠菜甾酮 HPLC≥98% 5mg
小鼠瘦素(LEP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseLeptin,LEPELISAkit 96T/48T 伏立康唑 Voriconazole 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 伏立康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Voriconazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatFractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 伏立諾他 Vorinostat/SAHA 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
AKT蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25 伏立諾他(標(biāo)準(zhǔn)品) Vorinostat/SAHA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA試劑盒小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 醋酸阿基瑞林 Argireline Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠糖抗原125(CA125)ELISA試劑盒 ,英文名: CA125 ELISA Kit L-甲狀腺素/左旋甲狀腺素 Levothyroxine 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 96T/48T 腺嘌呤 Adenine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
牛卵泡抑素(FST)試劑盒 Bovine Follistatin,FST ELISA kit 腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品) Adenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
英文名稱HumanErythropoietinELISAKit人紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISAKit規(guī)格:96T/48T 琥乙紅霉素 Erythromycin ethylsuccinate 質(zhì)量規(guī)格:potency>765 µg of erythromycin (C37H67NO13) per mg,USP35
動(dòng)物糖蛋白刀豆蛋白A(ConA)樹脂法化試劑盒5 布洛芬 Ibuprofen 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP/USP
小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說明Residues of rat and bovine serum albumin detection ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA試劑盒 羥甲煙胺(標(biāo)準(zhǔn)品) N-(Hydroxymethyl)nicotinamide 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
R-G細(xì)胞活力和凋亡檢測(cè)試劑盒100 羥達(dá)沙替尼 Hydroxymethyl Dasatinib 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
R-G細(xì)胞活力和凋亡檢測(cè)試劑盒50 羥基紫檀茋 HPLC≥98% 20mg
RhoA鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 羥基原人參二醇 HPLC≥98% 10mg
RhoB鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 羥基芫花素 HPLC≥98% 20mg
RhoC鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 羥基羽扇豆鹼 HPLC≥95% 20mg
RHODAMINE110蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/) 羥基異亮氨酸 HPLC≥98% 20mg
RHO蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25 羥基異補(bǔ)骨脂酚 HPLC≥95% 20mg
RHO蛋白共沉淀分析試劑盒5 羥基乙酰氧基甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg
Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基乙酰氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg
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