小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞【Mouse Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠蛋白激酶Cη(PKCη)ELISA試劑盒 ，英文名： PKCη ELISA Kit PI3K 抑制劑  LY294002  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,進(jìn)分

小鼠蛋白激酶D1(PRKD1)ELISA試劑盒 ，英文名： PRKD1 ELISA Kit 磺酸鈉  SHES  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

小鼠蛋白激酶N2(PKN2)ELISA試劑盒 ，英文名： PKN2 ELISA Kit 醋酸鉀  PHES  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

小鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)ELISA試劑盒 ，英文名： PKIβ ELISA Kit 磺酸銨鹽  AHES  質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)ELISA試劑盒 ，英文名： PKIγ ELISA Kit 磺酸  HES  質(zhì)量規(guī)格：>80%,粘狀液體

小鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒 ，英文名： PRG4 ELISA Kit DIPSO.Na;3-[N-N-雙(2-)氨基]-2-羥基丙磺酸單鈉鹽  DIPSO Mono  質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠蛋白酪酸0酸酶受體H(PTPRH)ELISA試劑盒 ，英文名： PTPRH ELISA Kit DIPSO; 3-[N-N-雙(2-)氨基]-2-羥基丙磺酸   DIPSO  質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠蛋白酪酸0酸酶受體O(PTPRO)ELISA試劑盒 ，英文名： PTPRO ELISA Kit 2,3-二巰基丙磺酸鈉  DMPS  質(zhì)量規(guī)格：>95%,一水合物

小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒 ，英文名： PR3 ELISA Kit CHPS-Na；3-氯-2-羥基丙磺酸鈉  CHPS-Na  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

小鼠蛋白酶激活受體2(PAR2)ELISA試劑盒 ，英文名： PAR2 ELISA Kit SBES；2-乙基磺酸鈉   2-bromoethanesulphonate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
MousegranzymesA,Gzms-AELISA試劑盒小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 妥布霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tobramycin Base  質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GRα)ELISA試劑盒 ，英文名： GRα ELISA Kit 硫酸妥布霉素  Tobramycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量634μg/mg-739μg/mg,BR

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 96T/48T 硫酸妥布霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tobramycin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定

牛球蛋白A(IgA)試劑盒 Bovine Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 托萘酯  Tolnaftate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP30,BR

英文名稱HumanErythropoietinsolublereceptorELISAKit人紅細(xì)胞生成素受體(EPOsR)規(guī)格：96T/48T 拓?fù)涮婵蝶}酸鹽  Topotecan HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%

動(dòng)物糖蛋白硼酸(APA)樹脂法化試劑盒5 拓?fù)涮婵蝶}酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）  Topotecan HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

raesistinELISA試劑盒大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 托拉塞米  Torasemide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 曲沃前列素  Travoprost  質(zhì)量規(guī)格：含>99.0%

Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 鹽酸曲唑酮  Trazodone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 鹽酸曲唑酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Trazodone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞直銷Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 芹菜素  Apigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR

Ratα1-microglobulin,α1-MGELISAKit大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 芹菜苷; 芹黃苷  Apiin   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Ratα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 芹菜苷 HPLC≥98% 10mg

Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 親和素；卵白素來源于雞蛋白  Avidin from egg white  質(zhì)量規(guī)格：10-15 units/mg protein,進(jìn)分

Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISA試劑盒大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 茄尼醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Solanesol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品

Ratα-Glucosidase,a-GluELISAKit大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 茄尼醇 HPLC≥97% 20mg

Ratα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 茄尼醇  Solanesol  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

Ratβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蕎麥堿 HPLC≥98% 20mg

Ratβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA試劑盒大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 喬松素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pinocembrin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Ratβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 喬松素 HPLC≥98% 20mg
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。