當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2人脈絡(luò)膜血管平滑肌細胞價格
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
人脈絡(luò)膜血管平滑肌細胞【Human Eyes: Normal Choroidal Vascular Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人脈絡(luò)膜血管平滑肌細胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963770 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
RatcoagulationfactorⅫ,FⅫELISA試劑盒大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蘇木酮A HPLC≥95% 20mg
Ratcoicoopieleasinghormone,CRH大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲黃腐醇 HPLC≥95% 20mg
Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISA試劑盒大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異丹參酮II HPLC≥95% 20mg
ratCoicosterone,CO大鼠皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 紫丹參素C HPLC≥95% 20mg
ratCoicosterone,COELISA試劑盒大鼠皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 維采寧 HPLC≥95% 20mg
RatCoisol大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化飛燕草素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCoisolELISA試劑盒大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化飛燕草素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCollagenaseI大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化飛燕草素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCollagenaseIELISA試劑盒大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化矢車菊素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatCollagenaseTypeII大鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化矮牽牛素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸甲氯芬酯 Meclofenoxate HCl 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
小鼠調(diào)節(jié)激活正常T-細胞表達分泌因子(RAES)ELISA試劑盒 ,英文名: RAES ELISA Kit 鹽酸甲氯芬酯(標準品) Meclofenoxate HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA檢測試劑盒GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T 醋酸甲地孕酮 Megestrol Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,USP31
牛葡萄糖60酸脫氫酶(G6PD)試劑盒 Bovine Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase,G6PD ELISA Kit 醋酸甲地孕酮(標準品) Megestrol Acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)規(guī)格:96T/48T 美拉諾坦II;MTII Melanotan ⅡAcetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物全血線粒體粗提分離試劑盒10 美洛昔康 Meloxicam 質(zhì)量規(guī)格:>99%
Ratprostatespecificaigen,PSAELISA試劑盒大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 美洛昔康(標準品) Meloxicam 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
小鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒 ,英文名: AST ELISA Kit 鹽酸美金剛胺 Memantine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin17,IL-17ELISAKit 96T/48T 鹽酸美金剛(標準品) Memantine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
人骨形成蛋白4(BMP4)試劑盒 Human BMP4 ELISA Kit 甲氨蝶呤 Methotrexate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人脈絡(luò)膜血管平滑肌細胞價格RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA試劑盒大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲烏藥堿鹽酸鹽 Higenamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatproteinkinaseB,PKBELISAKit大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲烏藥堿 HPLC≥98% 20mg
RatproteinkinaseB,PKBELISA試劑盒大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲維拉帕米鹽酸鹽 Norverapamil, 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RatProteinPhosphatase,PPELISAKit大鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲替林鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg
RatProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒大鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲絡(luò)石甙元 HPLC≥98% 5mg
RatP-SelectinELISAKit大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去鹽酸左氧氟沙星 Desmethyl Levofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RatP-SelectinELISA試劑盒大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去鹽酸氧氟沙星 Desmethyl Ofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit大鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去鹽酸環(huán)苯扎林 Desmethyl Cyclobenzaprine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISA試劑盒大鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去西立伐他汀鈉鹽 Desmethyl Cerivastatin, Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RatPyridinoline,PYDELISAKit大鼠酚(PYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去西立伐他汀-O-β-D-葡萄糖苷酸 Desmethyl Cerivastatin-O-β-D-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
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