當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2人膀胱上皮細胞說明
人膀胱上皮細胞【Human Bladder :Normal Bladder Epithelial Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人膀胱上皮細胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963739 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒 Human α-Endomorphin,α-EP ELISA Kit 三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Tricyclazol solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA檢測試劑盒Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMA 96T/48T 三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) Tricyclazol solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)試劑盒 Human α-SMA ELISA Kit 氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%) Trifluralin solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA檢測試劑盒Humanα-Glucosidase 96T/48T 草達津(標(biāo)準(zhǔn)品) Trietazine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒 Human α-glucosidase ELISA Kit 阿克泰(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%) Thiamethoxam 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
人α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA檢測試劑盒Humanα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDH 96T/48T 三唑酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%) Triadimefon 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%
人α乳清蛋白(α-La)ELISA檢測試劑盒HumanαLactalbumin,α-La 96T/48T 無水硫酸鈉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm) sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm
人α乳清蛋白(α-La)試劑盒 Human α-La ELISA Kit 甲嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfometuron-methyl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)試劑盒 Human α-ketoglarate dehy-drogenase,α-KGDHC ELISA Kit 西草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%) Simetryne 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%
人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA檢測試劑盒Humanα-Synuclein,α-SYN 96T/48T 喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%) Quizalofop-ethyl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%
兔子可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA檢測試劑盒RabbitsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 96T/48T 紫堇達明堿 HPLC≥95% 20mg
牛腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 Bovine adrenomedullin,ADM ELISA kit 木蘭脂素 HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumanbFGFELISAKit人堿性成纖維生長因子(bFGF)規(guī)格:96T/48T 異它喬糖甙 HPLC≥95% 20mg
動物垂體組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 橙皮素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
Ratplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 美迪紫檀素 HPLC≥98% 20mg
小鼠微管蛋白α3A(TUBα3A)ELISA試劑盒 ,英文名: TUBα3A ELISA Kit 葉下珠素 HPLC≥95% 20mg
兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA檢測試劑盒Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T ,(E)瓦來薩明堿 HPLC≥95% 20mg
牛(EPI)試劑盒 Bovine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 山姜素 HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumahyroidAbELISAKit人甲狀腺素抗體(ThyroidAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 銀杏酸C: HPLC≥98% 20mg
動物單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量檢測試劑盒20 前胡素 HPLC≥98% 20mg
人膀胱上皮細胞說明RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Sucralose 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatLactateDehydrogenase,LDHELISAKit大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯蔗糖 HPLC≥98% 20mg
RatLactateDehydrogenase,LDHELISA試劑盒大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯生 Triclosan 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Dicofol standard solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
RatLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=5%) Dicofol standard solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=5%
RatLaminin,LNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
RatLaminin,LNELISA試劑盒大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%
RatLDL-ICELISAKit大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯卡班 Triclocarban 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%
RatLDL-ICELISA試劑盒大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三氯氨鉑酸鉀 Potassium trichloroammineplatinate(II) 質(zhì)量規(guī)格:>95%
RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 三裂尾草素(供應(yīng)商少) HPLC≥98% 5mg
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。