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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人血管內(nèi)皮細(xì)胞直銷
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
人血管內(nèi)皮細(xì)胞直銷 | T25m2 | CS-963729 |
人血管內(nèi)皮細(xì)胞【Human Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測(cè)試劑盒RatgranzymesA,Gzms-A 96T/48T 葡聚糖D20/右旋糖苷 Dextran D20 質(zhì)量規(guī)格:MW:16000~24000
大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 Rat granzymes A,Gzms-A ELISA Kit 沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽 Saxagliptin HCL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA檢測(cè)試劑盒RatgranzymesB,Gzms-B 96T/48T 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG95%) EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract 質(zhì)量規(guī)格:茶多酚≥98%,EGCG≥95%,≤0.1%
大鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISA Kit 達(dá)沙替尼一水合物 Dasatinib Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠可溶性CD14(sCD14)試劑盒 Rat soluble cluster of differeiation 14,sCD14 ELISA Kit 依西美坦 Exemestane (USP) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,Aromatase inhibitor
大鼠可溶性CD23(sCD23)試劑盒 Rat soluble CD23,sCD23 ELISA Kit 依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Exemestane 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit Amidopyrine/aminopyrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒 Rat Soluble Cluster of differeiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit 血管緊張素II Angiotensin II 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR
大鼠可溶性CD80(sCD80)試劑盒 Rat Soluble Cluster of Differeiation 80,sCD80 ELISA Kit 維生素 D3 ((膽骨化醇) Vitamin D3 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)4000萬(wàn)IU/g
大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒 Rat soluble Cluster of differeiation 86,sCD86 ELISA Kit 帕唑帕尼鹽酸鹽 Pazopanib HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
RatEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 貝萼皂苷元甲酯 HPLC≥95% 20mg
5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒20 氧代坡模酸甲酯 HPLC≥95% 20mg
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Alpha生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒 ,英文名: VC ELISA Kit 佛波醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseE-SelectinELISAkit 96T/48T 三七皂苷T HPLC≥95% 20mg
人過(guò)氧化氫酶(CAT)試劑盒 Human Catalase,CAT ELISA kit 帕克醇 HPLC≥95% 20mg
ratEndothelin1,ET-1ELISAKit大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沒(méi)食子?;鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg
5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20 沒(méi)食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg
MousefactorB,BFELISA試劑盒小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氧蘇木查耳酮 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素B9(VB9)ELISA試劑盒 ,英文名: VB9 ELISA Kit 過(guò)氧去氫土莫酸 HPLC≥95% 20mg
人血管內(nèi)皮細(xì)胞直銷RatIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山苦草素A HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISAKit大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山橘脂酸 HPLC≥95% 20mg
RatIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山椒子烯酮 HPLC≥98% 10mg
RatIerleukin10,IL-10ELISAKit大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山椒子烯醇 HPLC≥98% 10mg
RatIerleukin10,IL-10ELISA試劑盒大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山姜素(標(biāo)準(zhǔn)品) Alpinetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山姜素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin11,IL-11ELISA試劑盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山姜素 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山梗菜堿 HPLC≥97% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山柑子堿 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin12,IL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
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