人食管平滑肌細胞【Human Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3A(W3A)ELISA試劑盒 ，英文名： W3A ELISA Kit 神經(jīng)肽W-30，大鼠  Neuropeptide W-30 (rat)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(W5A)ELISA試劑盒 ，英文名： W5A ELISA Kit 神經(jīng)降壓素（1-8）  Neurotensin (1-8)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA檢測試劑盒MousePeosidine 96T/48T 神經(jīng)肽Y（13-36），豬  Neuropeptide Y (13-36)(porcine)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒 ，英文名： Peosidine ELISA Kit 神經(jīng)肽Y（2-36），人，大鼠  Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠硒蛋白M(SELM)ELISA試劑盒 ，英文名： SELM ELISA Kit 神經(jīng)肽Y（22-36）  Neuropeptide Y (22-36)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA試劑盒 ，英文名： SEPP1 ELISA Kit 神經(jīng)肽Y（3-36），豬  Neuropeptide Y (3-36)(porcine)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)ELISA試劑盒 ，英文名： PDCD1LG1 ELISA Kit 骨鈣素（7-19），人  Osteocalcin (7-19) (human)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細胞毒性T細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒 ，英文名： CTLA-4/CD152 ELISA Kit 成骨生長肽  Osteogenic Growth Peptide  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA試劑盒 ，英文名： CDC25 ELISA Kit 骨抑制素，人  Osteostatin (human)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

小鼠細胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA試劑盒 ，英文名： ARC ELISA Kit 骨抑制素（1-5）酰胺，人，牛，狗，大鼠，小鼠，兔，馬  Osteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
英文名稱HumanargininevasopressinELISAKIT人精氨酸加壓素規(guī)格：96T/48T 人參皂苷Rk HPLC≥98% 20mg

調(diào)料D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20 原莪述烯醇 HPLC≥95% 20mg

RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISA試劑盒大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 醉椒素 HPLC≥95% 20mg

小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 ，英文名： VK1 ELISA Kit ，二氫甲氧醉椒素 HPLC≥95% 20mg

小鼠白細胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測試劑盒MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T 黃卡瓦胡椒素B HPLC≥95% 20mg

人含SET域4(setd4)試劑盒 human setd4 ELISA Kit ,二甲氧基黃烷酮 HPLC≥95% 20mg

RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 楮樹黃酮醇F HPLC≥95% 20mg

4-氨基-3-肼基-5巰基-1，2，4-三氮唑(AHMT)10克 ,'二異戊烯基金雀異黃素 HPLC≥95% 20mg

MouseEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 山豆根黃烷酮A HPLC≥95% 20mg

小鼠維生素K1(VK1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 龍血素D HPLC≥95% 20mg
人食管平滑肌細胞說明Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 麝香酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Muscone  質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 麝香酮 GC≥98% 0.15ml

Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 麝香草酚（標(biāo)準(zhǔn)品）  Thymol  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

Ratheatshockprotein70,hSP-70ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 麝香草酚 GC≥98% 100mg

Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 麝香草酚  Thymol  質(zhì)量規(guī)格：AR

Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蛇紋石素 HPLC≥98% 5mg

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蛇葡萄素F HPLC≥95% 20mg

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蛇莓甙A HPLC≥98% 5mg

RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蛇根亭堿 HPLC≥98% 5mg

RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 蛇床子素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Osthole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。