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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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流感病毒H3N2亞型熒光PCR法檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-07-19 17:13:27瀏覽次數(shù):153次

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流感病毒H3N2亞型熒光PCR法檢測(cè)試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:流感病毒H3N2亞型熒光PCR法檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號(hào):CP99104
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

儲(chǔ)存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
112228-65-6  B220  5mg  Porcine Sapovirus(PoSaV)豬札如病毒(札幌病毒)RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

112229-51-3  Z-D-Orn-OH  1g  Porcine Sapelovirus(PSV)豬薩佩羅病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

112229-51-3  Z-D-Orn-OH  5g  Porcine Sapelovirus(PSV)豬薩佩羅病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

112241-19-7  SMPT  100mg  Bartonella vinsonii文氏巴爾通體LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1122578-89-5  1-Myristoyl-2-Palmitoyl-3-Butyryl-rac-glycerol  10mg  Bartonella quintana五日熱巴爾通體LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20
(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Lauric acid  RatAi-Thrombin,AT-ELISA試劑盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  己糖激酶(HK)測(cè)試盒 可見分光光度法 50/48

結(jié)晶質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCrystalline  小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA試劑盒大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Delta-催激素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRDelta-MSH  Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒  HumanInhibin,INH-AELISA試劑盒人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

內(nèi)皮素2,人,犬質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREndothelin 2 (human, canine)  Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit人膜攻擊復(fù)合物(MAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
流感病毒H3N2亞型熒光PCR法檢測(cè)試劑盒143TK細(xì)胞,人胸腺激酶缺陷性細(xì)胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-13,5--L-酪氨酸3,5-Diiodo-L-tyrosine質(zhì)量規(guī)格:BR,98%

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽L-Proline methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR

MG-63(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽L-Serine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

犬胸腺細(xì)胞;cf2ThL-色氨酸甲酯鹽酸鹽L-Tryptophan methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人前列腺平滑肌細(xì)胞(HPSMC)(5×105)L-酪氨酸甲酯L-Tyrosine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,65,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。

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