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大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物直銷

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產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-21 11:56:28瀏覽次數(shù):114次

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大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物直銷如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞處理:
1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物直銷

T25m2

CS-964149

大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物【Rat Coronary ArteryNormalCoronary Artery Derivatives】大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物是從大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取的,大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞從正常大鼠動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mgRNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

潛在的應用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學;<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37,5%CO2  培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
1140844-61-6  L-hydroxy Arginine (acetate)  50mg  Ostertagia trifurcata三叉奧斯特線蟲LAMP試劑盒 

1140844-61-6  L-hydroxy Arginine (acetate)  5mg  Bluetongue Virus(BTV)藍舌病病毒1RT-LAMP試劑盒 

1140844-63-8  nor-NOHA (acetate)  10mg  Ostertagia podjapolskyi波氏奧斯特線蟲LAMP試劑盒 

1140844-63-8  nor-NOHA (acetate)  1mg  Ostertagia trifurcata三叉奧斯特線蟲LAMP試劑盒 

1140844-63-8  nor-NOHA (acetate)  50mg  Ostertagia ostertagi奧斯特奧斯特線蟲LAMP試劑盒
PC-12(高分化)PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)2,4-二乙基硫雜蒽-9-(>90.0%(GC))2,4-Diethylthioxanthen-9-one質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)

癌細胞;MDA-MB-231 視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL安乃近(標準品)Analgin質(zhì)量規(guī)格:含量測定

肺泡上皮細胞cDNAHPAEpiC cDNA艾格列凈;依帕列凈;恩格列嗪Empagliflozin; BI-10773質(zhì)量規(guī)格:>99%,SGLT-2抑制劑

SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 細胞裂解液 (陽性對照) BQ123BQ-123質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3泛影酸(標準品)diatrizoic acid質(zhì)量規(guī)格:鑒別
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物直銷食道平滑肌細胞裂解物HESMCL左旋氨氯地平/苯磺酸左旋氨氯地平(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定(S)-Amlodipine

水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T細胞白血病細胞,Jurkat,Clone E6-1細胞 MPC-83細胞,小鼠胰腺腺泡細胞癌細胞曲尼司特質(zhì)量規(guī)格:>98.0%Tranilast

肝永生化細胞;THLE-3曲尼司特(標準品)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品Tranilast

COCH Others Human  COCH / Cochlin ( isoform short ) 細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢羥氨芐 (標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定用CEFADROXIL

CL-0120HuH-7(肝癌細胞)5×106cells/瓶×2紫檀芪(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品Pterostilbene
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

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