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正常大鼠腎細胞;NRK-52E操作步驟

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所  在  地上海市

更新時間:2017-05-27 11:19:06瀏覽次數(shù):135次

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細胞名稱      正常大鼠腎細胞;NRK-52E操作步驟
形態(tài)特性       上皮細胞
生長特性      貼壁生長
特征特性        
培養(yǎng)條件       DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質胎牛血清,5%
傳代方法       消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況      P(16+5)
凍存條件       基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      陰性
STR      
同工酶      
染色體      
使用權限      A類
正常大鼠腎細胞;NRK-52E操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
正常大鼠腎細胞;NRK-52E操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
binding prevents from dephosphorylation and inactivation (By similarity). Interacts with TPR. 
Subcellular Location : Cytoplasm. Nucleus. Note=Autophosphorylation at Thr-207 promotes nuclear localization.
Post-translational modifications : Phosphorylated upon KIT and FLT3 signaling (By similarity). Dually phosphorylated on Thr-202 and Tyr-204, which activates the enzyme. Ligand-activated ALK induces tyrosine phosphorylation. Dephosphorylated by PTPRJ at Tyr-204.
Similarity : Belongs to the protein kinase superfamily. CMGC Ser/Thr protein kinase family. MAP kinase subfamily.
Contains 1 protein kinase domain.
Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P27361.4
英文名稱  Anti-Estrogen Receptor alpha 
中文名稱  雌激素受體α抗體 
別    名  Estradiol receptor; Estrogen receptor alpha; Estradiol Receptor-alpha; Estrogen Receptor 1; Atherosclerosis, susceptibility to, included; DKFZp686N23123; ER Alpha; ER; ER-alpha; ERalpha; ER[a]; Era; ESR; ESR1;          朊蛋白DPL抗體    ,現(xiàn)貨供應,貨期短,質量可靠。僅用于科研實驗不應用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務,全程實驗指導。    英文名稱:    Doppel    朊蛋白DPL抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復凍融。
肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激酶抗體    ,現(xiàn)貨供應,貨期短,質量可靠。僅用于科研實驗不應用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務,全程實驗指導。    英文名稱:    DMPK    肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激酶抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復凍融。
有絲分裂控制蛋白dis3抗體    ,現(xiàn)貨供應,貨期短,質量可靠。僅用于科研實驗不應用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務,全程實驗指導。    英文名稱:    DIS3    有絲分裂控制蛋白dis3抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達10000多正常大鼠腎細胞;NRK-52E操作步驟種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長期保存保存 1 年以上,避免反復凍融。
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