當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>RNA/DNA提取>> ADA Buffer
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:ADA Buffer
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100580
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
霍亂弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThianaphthene955苯并噻吩
河弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThiamphenicol153185甲砜霉素
擬態(tài)弧菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThevetin B271279
艱難梭菌實時熒光PCR檢測試劑盒TThevebioside1145867
艱難梭菌tcdA基因?qū)崟r熒光PCR檢測試劑盒TTetrahydrolachnophyllum lactone5677
小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Chlorhexidine acetate 中文名:醋酸氯己定 分子式:C26H38Cl2N10O4
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白elisa試劑盒 小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白試劑盒、小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Mannitol 中文名:甘露醇 分子式:C6H14O6
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(mouse ECP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Diclofenac 中文名:雙氯芬酸鈉 分子式:C14H10Cl2NNaO2
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit Ergosterol peroxide glucoside 140447-22-9 中文名:過氧化麥角甾醇葡萄糖苷 分子式:C34H54O8 度:85.0% 關(guān)鍵詞: 麥角甾烷; 甾苷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 英文名稱: Mouse Eosinophil Cationic Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ECP Dabigatran etexilate 中文名: 分子式:C34H41N7O5 度:98.0%
ADA Buffer黃腐酚 D HPLC≥98% 5mg 蛋白電泳麗春紅染色試劑盒10
黃花菜木脂素 A HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃花香茶菜甲素 HPLC≥98% 5mg 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)ELISA試劑盒
黃花香茶菜甲素,黃花甲素,大萼變型甲素 HPLC≥98% 5mg Rat calcium binding protein (CR) ELISA Kit 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒
黃夾苦甙 HPLC≥98% 5mg Humanai-myelinaibodyIgAELISAKit 人抗髓0脂抗體IgA(ai-myelinAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
黃卡瓦胡椒素 A HPLC≥98% 5mg CamelBeta-Endorphin,β-EPELISA試劑盒駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃苦木素B乙酸酯 HPLC≥98% 5mg 魚類組織元素?zé)晒舛繖z測試劑盒20
黃蓮木酸 HPLC≥98% 5mg Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃芩酸 HPLC≥98% 5mg 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒 ,英文名: ACE2 ELISA Kit
黃肉楠堿 HPLC≥98% 5mg 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA檢測試劑盒Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 96T/48T
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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