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上海莼試生物技術有限公司
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Laemmli’s

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-08-02 13:02:51瀏覽次數(shù):128次

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Laemmli’s客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

特點優(yōu)勢:
1.
特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   
優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。

產(chǎn)品名稱

Laemmli’s

規(guī)格

詳見說明

貨號

CP100653

具有下列特點:
1.
即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2.
引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix
中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4.
提供陽性對照,便于分析試驗結果。

PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

腸出血性大腸桿菌致賀毒素1Stx1)單重熒光PCR檢測試劑盒481-Methyl-aminomethyl naphthalene144895

腸出血性大腸桿菌致賀毒素2Stx2)單重熒光PCR檢測試劑盒48Terbinafine911611特比萘芬

腸出血性大腸桿菌黏附抹平因子(Eae)單重熒光PCR檢測試劑盒48N-[3-Chloro-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-iodoquinazolin-amine23127

腸出血性大腸桿菌溶血素(Hly)單重熒光PCR檢測試劑盒483-Chloro-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene4438829

腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)單重熒光PCR檢測試劑盒485-(4-((3-chloro-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-yl)furan-carbaldehyde2312784
小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒     Escitalopram oxalate  219861-08-2  中文名:草酸西酞普蘭  分子式:C22H23FN2O5  度:99.0%   

小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit     Erythritol  中文名:赤蘚糖醇  分子式:C4H10O4  度:%

小鼠抗心0脂抗體elisa試劑盒   小鼠抗心0脂抗體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠抗心0脂抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗心0脂抗體試劑盒、小鼠抗心0脂抗體elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Estradiol hexahydrobenzoate  15140-27-9  中文名:環(huán)己甲酸雌二醇  分子式:C25H34O3 

小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISAKit     Erlotinib   中文名:鹽酸埃羅替尼  分子式:C22H24ClN3O4  度:98.0%

小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISAKit                 Bis(phenylacetyl) disulfide  中文名:雙(苯乙酰)二硫化物  分子式:C16H14O2S2
Laemmli’s,
二氫丹參二醇 B HPLC95% 20mg 牛新包蟲抗體試劑盒 Bovine Neospora Caninum Aibody ELISA Kit

,二氫丹參二醇 C HPLC95% 20mg 英文名稱Humaarate-resistaacidphosphataseorm5bELISAKit人抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

丹參酚酮 HPLC95% 20mg 低鹽LB細菌培養(yǎng)液500毫升

△去氫彌羅松酚 HPLC95% 20mg RatOsteoprotegerin,OPGELISA試劑盒大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

甲二氫丹參醌 HPLC95% 20mg 小鼠細胞毒性T細胞相關抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒 ,英文名: CTLA-4/CD152 ELISA Kit

對葉百部堿 HPLC95% 20mg 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-)ELISA檢測試劑盒Mouseangiotension,ANG-ELISAKit 96T/48T

伏康京堿 HPLC95% 20mg 人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝臟,嗜酸性粒細胞源性神經(jīng))(RNASE2)試劑盒 Human RNASE2 ELISA kit

()扁柏脂素,蓽澄茄內(nèi)脂 HPLC95% 20mg Ratdiamineoxidase,DAOELISAKit大鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

疏展香茶菜寧E HPLC95% 20mg 3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性終點比色法定量檢測試劑盒50

去芹桔梗皂苷D HPLC95% 20mg MouseEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熒光定量PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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