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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

13585831301

PCR級(jí)DMSO

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-08-02 13:08:14瀏覽次數(shù):141次

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PCR級(jí)DMSO運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?/span>5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。

具有下列特點(diǎn):
1.
即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2.
引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp
3. PCR mix
中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4.
提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

PCR級(jí)DMSO

規(guī)格

詳見說(shuō)明

貨號(hào)

CP100652

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.
特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   
優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

腸道病毒(EV-U)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑TValdecoxib1816952帕瑞考昔

腸道病毒71(EV71)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑TUzarigenin4669

柯薩奇病毒A16型(CA16)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑TUzarigenin digitaloside6121

柯薩奇病毒A型(CA)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑Tucralose5383三氯蔗糖

柯薩奇病毒A6(CA6)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑TTryptophan1534
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISAKit     Enalapril maleate  中文名:馬來(lái)酸依那普利  分子式:C24H32N2O9 

小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒     Escitalopram oxalate  中文名:草酸西酞普蘭  分子式:C22H23FN2O5  度:99.0%

小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit     Erythritol  中文名:赤蘚糖醇  分子式:C4H10O4 

小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒     Escitalopram oxalate  中文名:草酸西酞普蘭  分子式:C22H23FN2O5 

小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit     Erythritol  149-32-6  中文名:赤蘚糖醇  分子式:C4H10O4  度:關(guān)鍵詞:  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
PCR
級(jí)DMSO補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 HPLC95% 20mg 低分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣100

異補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 HPLC95% 20mg RatOsteopoin,OPNELISA試劑盒大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

異新補(bǔ)骨脂異黃酮 HPLC95% 20mg 小鼠細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA試劑盒 ,英文名: ARC ELISA Kit

羥基羽扇豆鹼 HPLC95% 20mg 兔抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitAi-endothelialcellaibodies,AECAELISAKit 96T/48T

靈芝酸TR HPLC95% 20mg 牛雄(ASD)試劑盒 Bovine Androstenedione,ASD ELISA Kit

靈芝烯酸A HPLC95% 20mg 英文名稱HumanAT-IIIELISAKit人抗凝血酶(AT-III)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

靈芝酸TQ HPLC95% 20mg 低內(nèi)小量質(zhì)粒抽提試劑盒20/50

靈芝烯酸C HPLC95% 20mg RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA試劑盒大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Delta avenasterol HPLC95% 20mg 小鼠細(xì)胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA試劑盒 ,英文名: CDC25 ELISA Kit

Delta avenasterol HPLC95% 20mg 兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 96T/48T


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