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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>小鼠源細(xì)胞>> 雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟

雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟

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更新時(shí)間:2017-05-18 16:26:29瀏覽次數(shù):97次

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雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

細(xì)胞名稱      雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟
形態(tài)特性       淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性      半貼壁生長(zhǎng)
特征特性       可產(chǎn)生單克隆抗體;凍存前做支原體去除 
培養(yǎng)條件       RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法       保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況      
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)      培養(yǎng)法(-)
STR       -
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      B類
雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
雞肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒    Chicken mycoplasma pneumoniae(MP)antibody(IgG)ELISA kit
雞多巴胺(DA)免疫試劑盒    Chicken dopamine,DA ELISA kit
雞凋亡相關(guān)因子(FAS)免疫試劑盒    Chicken Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit
雞低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒    Chicken low density lipoprotein,LDL ELISA kit
雞的牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒    Chicken rudimental bovine serum albumin(BSA)check-up ELISA kit
雞膽囊收縮素A受體(CCKAR)免疫試劑盒    Chicken Cholecystokinin A Receptor,CCKAR ELISA Kit
雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒    Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit
雞催乳素(PRL/LTH)免疫試劑盒    Chicken Prolactin/Luteotropic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒    Chicken adrenocorticotropic hormone,ACTH ELISA kit
雞促卵泡素(FSH)免疫試劑盒    Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
雞促甲狀腺素(TSH)免疫試劑盒    Chicken thyroid stimulating hormone,TSH ELISA kit

蛋白酪氨酸磷酸酶ⅣA3(PTPⅣA3)ELISA試劑盒    ,英文名:    PTPⅣA3 ELISA Kit
蛋白酪氨酸激酶2β(PTK2β)ELISA試劑盒    ,英文名:    PTK2β ELISA Kit
蛋白聚糖3(PRG3)ELISA試劑盒    ,英文名:    PRG3 ELISA Kit
蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)ELISA試劑盒    ,英文名:    PKIγ ELISA Kit
蛋白激酶Cγ(PKCγ)ELISA試劑盒    ,英文名:    PKCγ ELISA Kit
蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)ELISA試劑盒    ,英文名:    PKCβ1 ELISA Kit
蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA試劑盒    ,英文名:    PICK1 ELISA Kit
雜交瘤(B類);Z173B1C8A11E7B8E2操作步驟蛋白激酶Bγ(PKBγ)ELISA試劑盒    ,英文名:    PKBγ ELISA Kit
蛋白激酶Bβ(PKBβ)ELISA試劑盒    ,英文名:    PKBβ ELISA Kit
蛋白激酶Bα(PKBα)ELISA試劑盒    ,英文名:    PKBα ELISA Kit
蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDI ELISA Kit
蛋白二硫化物異構(gòu)酶A6(PDIA6)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDIA6 ELISA Kit

     

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