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KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22操作步驟

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更新時間:2017-05-18 16:03:37瀏覽次數(shù):108次

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KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱      KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22操作步驟
形態(tài)特性       實(shí)體瘤
生長特性      體內(nèi)生長
特征特性       1957年建株;20-甲基膽蒽溶于膽固醇,埋于Km小鼠大腦皮質(zhì)誘發(fā)的未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤(神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤),同系小鼠皮下移植及傳代,移植成功率。 
培養(yǎng)條件        -
傳代方法       制備成細(xì)胞懸液接種至Km小鼠。
傳代情況      不詳
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      培養(yǎng)法(-)
STR       -
同工酶      
染色體       -
使用權(quán)限      A類
 KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
 KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
綿羊雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒    Sheep Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
綿羊粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)免疫試劑盒    Sheep Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
綿羊雌二醇(E2)免疫試劑盒    Sheep Estradiol,E2 ELISA Kit
綿羊成纖維細(xì)胞因子23(FGF23)免疫試劑盒    Sheep Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)免疫試劑盒    Sheep Complement fragment 3b recptor,C3bR ELISA Kit
綿羊補(bǔ)體片段3a(C3a)免疫試劑盒    Sheep complement fragment 3a,C3a ELISA kit
綿羊白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒    Sheep Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
綿羊白介素6(IL-6)免疫試劑盒    Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
綿羊白介素4(IL-4)免疫試劑盒    Sheep Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
綿羊白介素2受體(IL-2R)免疫試劑盒    Sheep Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA kit

集鈣蛋白(Q)ELISA試劑盒    ,英文名:    Q ELISA Kit
棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)ELISA試劑盒    ,英文名:    EML2 ELISA Kit
分層蛋白(SFN)ELISA試劑盒    ,英文名:    SFN ELISA Kit
肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)ELISA試劑盒    ,英文名:    PARC ELISA Kit
腓骨蛋白7(FBLN7)ELISA試劑盒    ,英文名:    FBLN7 ELISA Kit
肥胖抑制素(OB)ELISA試劑盒    ,英文名:    OB ELISA Kit
肥大細(xì)胞類糜蛋白酶1(CMA1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CMA1 ELISA Kit
 KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22操作步驟鯡精胺激酶(DOLK)ELISA試劑盒    ,英文名:    DOLK ELISA Kit
防御素β133(DEFβ133)ELISA試劑盒    ,英文名:    DEFβ133 ELISA Kit
防御素β132(DEFβ132)ELISA試劑盒    ,英文名:    DEFβ132 ELISA Kit
防御素β131(DEFβ131)ELISA試劑盒    ,英文名:    DEFβ131 ELISA Kit

 

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