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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12操作步驟

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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞名稱(chēng)      小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12操作步驟
形態(tài)特性       成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性      貼壁生長(zhǎng)
特征特性       該細(xì)胞來(lái)自NIH/3T3,可作逆轉(zhuǎn)錄病毒的包裝細(xì)胞。 
培養(yǎng)條件       DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法       1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況      C5
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)      培養(yǎng)法(-)
STR       -
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      A類(lèi)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
 人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgM)免疫試劑盒    Human coxiella burnetii Q fever phase 2(Q fever)antibody(IgM)ELISA kit
人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human coxiella burnetii Q fever phase 2(Q fever)antibody(IgG)ELISA kit
人Q熱科克斯體1(Q fever)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human Q fever IgG ELISA Kit
人Q熱科克斯體1(Q fever)抗體(IgA)免疫試劑盒    Human coxiella burnetii Q fever phase 1(Q fever)antibody(IgA)ELISA kit
人P選擇素(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒    Human P-Selectin ELISA kit
人P物質(zhì)受體(SP-R)免疫試劑盒    Human SP-R ELISA Kit
人p物質(zhì)(SP)免疫試劑盒    Human Substance P,SP ELISA Kit
人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白(P-cad)免疫試劑盒    Human P-cad ELISA Kit
人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒    Human PROM2 ELISA Kit
人Podocin 免疫試劑盒    Human podocin ELISA Kit金屬硫蛋白1H(MT1H)ELISA試劑盒    ,英文名:    MT1H ELISA Kit
解整合素金屬蛋白酶17(ADAM17)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADAM17 ELISA Kit
解整合素金屬蛋白酶15(ADAM15)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADAM15 ELISA Kit
解整合素金屬蛋白酶12(ADAM12)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADAM12 ELISA Kit
解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒    ,英文名:    ADAM10 ELISA Kit
解聚蛋白(DSTN)ELISA試劑盒    ,英文名:    DSTN ELISA Kit
結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移關(guān)聯(lián)基因1(MACC1)ELISA試劑盒    ,英文名:    MACC1 ELISA Kit
節(jié)律晝夜蛋白1(PER1)ELISA試劑盒    ,英文名:    PER1 ELISA Kit
接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTNAP4 ELISA Kit
接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTNAP2 ELISA Kit
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3);PA12操作步驟接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白1(CNTNAP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTNAP1 ELISA Kit
接觸蛋白6(CNTN6)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTN6 ELISA Kit
接觸蛋白5(CNTN5)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTN5 ELISA Kit
接觸蛋白4(CNTN4)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTN4 ELISA Kit
接觸蛋白3(CNTN3)ELISA試劑盒    ,英文名:    CNTN3 ELISA Kit

 

 

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