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雜交瘤細(xì)胞株;1H7F8實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞名稱 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣;圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞是由綿羊紅細(xì)胞免疫的BALB/c小鼠脾細(xì)胞和P3X63Ag8骨髓瘤細(xì)胞融合得到的。該細(xì)胞不分泌免疫球蛋白,對20 μg/ml的8-氮鳥嘌呤有抗性,對HAT比較敏感;該細(xì)胞可以作為細(xì)胞融合時(shí)的B細(xì)胞組分用于制備雜交瘤;鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 45~80
使用權(quán)限 A類
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒 ,英文名: CYP26A1 ELISA Kit
細(xì)胞附著蛋白2(CYTH2)ELISA試劑盒 ,英文名: CYTH2 ELISA Kit
細(xì)胞附著蛋白1(CYTH1)ELISA試劑盒 ,英文名: CYTH1 ELISA Kit
細(xì)胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA試劑盒 ,英文名: CDC25 ELISA Kit
細(xì)胞分裂周期因子23(CDC23)ELISA試劑盒 ,英文名: CDC23 ELISA Kit
細(xì)胞毒性T-淋巴細(xì)胞關(guān)聯(lián)抗原4(CTLA4)ELISA試劑盒 ,英文名: CTLA4 ELISA Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)ELISA試劑盒 ,英文名: PDCD6IP ELISA Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白6(PDCD6)ELISA試劑盒 ,英文名: PDCD6 ELISA Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白5(PDCD5)ELISA試劑盒 ,英文名: PDCD5 ELISA Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體2(PDCD1LG2)ELISA試劑盒 ,英文名: PDCD1LG2 ELISA Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)ELISA試劑盒 ,英文名: PDCD1LG1 ELISA Kit
細(xì)胞程序性死亡蛋白1(PDCD1)ELISA試劑盒 ,英文名: PDCD1 ELISA Kit
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒抗原免疫試劑盒 Human transfusion transimitted virus/hepatitis H virus antigen ELISA kit
人輸血傳播病毒(TTV)/辛型肝炎病毒抗體免疫試劑盒 Human transfusion transimitted virus(TTV)/hepatitis H virus antibody ELISA kit
人輸卵管特異性糖蛋白(OVGP1)免疫試劑盒 Human OVGP1 ELISA Kit
人瘦素(LEP)免疫試劑盒 Human Leptin,LEP ELISA kit
人受體型酪氨酸蛋白磷酸酶樣N(PTPRN)免疫試劑盒 Human PTPRN ELISA Kit
人受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2(RIPK2)免疫試劑盒 human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA Kit
人嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白(EMBP/MBP)免疫試劑盒 Human eosinophil granule major basic protein,EMBP/MBP ELISA Kit
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14操作步驟人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit
人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)免疫試劑盒 Human Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit
人嗜肺軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)免疫試劑盒 Human Legionella pneumophila antigen,LP Ag ELISA Kit
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