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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>RNA/DNA提取>> cDNA第二鏈合成試劑盒

cDNA第二鏈合成試劑盒

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品       牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-08-05 15:52:39瀏覽次數(shù):133次

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cDNA第二鏈合成試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:cDNA第二鏈合成試劑盒
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號(hào):CP100816
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

儲(chǔ)存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
86%RealPAGE預(yù)制膠   4-Hydroxysapriparaquinone12785

RealPAGE plus凝膠快速制備及電泳試劑盒   4-Hydroxy-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone8534

RealPAGE凝膠蛋白電泳試劑盒   板膠/板膠 4-Hydroxy-(3-methoxypropyl),4-dihydroH-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-sulfonamide 1,1-dioxide1541272

SDS-PAGE凝膠快速制備及電泳試劑盒   4-Difluoromethoxy-hydroxybenzaldehyde15138

SDS-PAGE凝膠制備試劑盒   4-Chlorotestosterone acetate8559醋酸氯
小鼠S100蛋白elisa試劑盒   小鼠S100蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠S100蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠S100蛋白試劑盒、小鼠S100蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  Bi-linderone  中文名:  分子式:C34H32O10  度:96.5%

小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒     Betamipron  中文名:倍他米隆  分子式:C10H11NO3  度:98.0%

小鼠Qa細(xì)胞抗原elisa試劑盒   小鼠Qa細(xì)胞抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠Qa細(xì)胞抗原試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Qa細(xì)胞抗原試劑盒、小鼠Qa細(xì)胞抗原eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。     Bi-linderone  中文名:  分子式:C34H32O10 

小鼠Qa細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒              Betamipron  中文名:倍他米隆  分子式:C10H11NO3 

小鼠Qa細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISAKit                 Ergosterol peroxide glucoside  140447-22-9  中文名:過氧化麥角甾醇葡萄糖苷  分子式:C34H54O8
cDNA
第二鏈合成試劑盒PD0325901  PD-0325901  質(zhì)量規(guī)格:>99%,ATP非競(jìng)爭(zhēng)性的MEK抑制劑 小鼠Ⅲ型膠原(Col)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseCollageype,ColELISAKIT 96T/48T

西他塞坦鈉/司他生坦鈉  Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin  質(zhì)量規(guī)格:度99% 人鈣網(wǎng)蛋白(C)試劑盒 Human C ELISA Kit

西他塞坦鈉/司他生坦鈉  Sitaxsentan ; TBC-11250; Thelin  質(zhì)量規(guī)格:度99% RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

西他塞坦鈉/司他生坦鈉  Sitaxsentan ; TBC-11251; Thelin  質(zhì)量規(guī)格:度99% PASE-1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25

輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸  Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid  質(zhì)量規(guī)格:>95% Mouselipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

拉米夫定  Lamivudine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,USP可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP40 ELISA Kit

拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lamivudine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 豬胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineInsulin,INSELISAKit 96T/48T

鹽酸三氟拉嗪  Trifluoperazine di  質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)試劑盒 Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit

鹽酸三氟拉嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)  Trifluoperazine di  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱HumanIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT人白介素-11(IL-11)規(guī)格:96T/48T

皮質(zhì)甾酮/腎上腺酮  Corticosterone  質(zhì)量規(guī)格:>97.0% 動(dòng)物脂肪組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,543,2。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。


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