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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:PCR級MgCl2
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100811
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對照。
alignment marker 15 bp/0bp0ulTestosterone enanthate3157庚酸
size marker 0bp.5kb0ulTestosterone decanoate57211癸酸
Alignment marker 15 bp/2 kb0ulTestosterone benzoate88117-安息香酸雄烯醇酮
革蘭氏陰性菌DNA提取試劑盒TTestosterone acetate459醋酸
天花病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒tert-Butyl4'-(bromomethyl)biphenyl-carboxylate11477
小鼠αL巖藻糖苷酶elisa試劑盒 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Bis(4-bromophenyl)acetylene 中文名:二(4-溴苯基)乙炔 分子式:C14H8Br2 度:98.0%
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒 Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 中文名:雙(3-乙基-5--4-馬來基苯基) 分子式:C27H26N2O4 度:98.0%
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISAKit Doxapram monohydrate 中文名:鹽酸多沙普侖 分子式:C24H33ClN2O3
小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa試劑盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Bis(4-bromophenyl)acetylene 中文名:二(4-溴苯基)乙炔 分子式:C14H8Br2
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 中文名:雙(3-乙基-5--4-馬來基苯基) 分子式:C27H26N2O4
PCR級MgCl2多球殼菌素;嗜熱菌殺酵母素(來源于無孢霉群) Myriocin from Mycelia sterilia 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,sigma分裝 RatVitaminD2,VD2ELISA試劑盒大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
亞精胺鹽酸鹽 Spermidine tri 質(zhì)量規(guī)格:≥98% 小鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit
栗精胺 Castanospermine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 豬透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測試劑盒PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T
精胺四鹽酸鹽;鹽酸精胺 Spermine tetra 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒 Rat ansforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit
D-熒光素鉀鹽,D-蟲熒光素鉀鹽 D-Luciferin potassium 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱HumanIerleukin-15,IL-15ELISAKIT人白介素-15(IL-15)規(guī)格:96T/48T
鹽酸雷尼替丁 Ranitidine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98% 動物源性食品豬源試劑盒20
鹽酸雷尼替丁(標(biāo)準(zhǔn)品) Ranitidine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminD3,VD3ELISA試劑盒大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熒光素鈉 Fluorescein di salt 質(zhì)量規(guī)格:BS 小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit
D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽 D-Luciferin salt 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA檢測試劑盒Mouseconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit 96T/48T
2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽 2',7'-Dichlorofluorescein Salt 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶2C型成員1(ATP2C1)試劑盒 human ATP2C1 ELISA Kit
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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