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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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Taq DNA聚合酶

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-08-05 16:25:09瀏覽次數(shù):166次

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Taq DNA聚合酶客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

具有下列特點(diǎn):
1.
即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2.
引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix
中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4.
提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

產(chǎn)品名稱(chēng)

Taq DNA聚合酶

規(guī)格

詳見(jiàn)說(shuō)明

貨號(hào)

CP100859

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?/span>5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1.
特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%
2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   
優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
2× SYBR Green qPCR 試劑盒次x μL反應(yīng)體系Ethyl β-D-apiofuranoside193251

ROX參比染料 μLMyricadenin A16122393

PicaGreen dsDNA 定量檢測(cè)試劑盒×0 μLLoroglossin581392

OligoGreen ssDNA 定量檢測(cè)試劑盒×0 μL6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose233746-O-對(duì)羥基苯甲酰葡萄糖

RibaGreen RNA 定量檢測(cè)試劑盒×0 μLCerebroside D1137739腦苷脂D
線(xiàn)粒體復(fù)合物II蛋白共沉淀分析試劑盒5  2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide  中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚  分子式:C12H10N2O2S  度:98.0%

線(xiàn)粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25  2-Amino-3-methylbenzoic acid  4389-45-1  中文名:2-氨基-3-苯甲酸  分子式:C8H9NO2  度:98.0%   

線(xiàn)粒體復(fù)合物III蛋白共沉淀分析試劑盒5  2-Amino-4-methylbenzothiazole  1477-42-5  中文名:2-氨基-4-苯并噻唑  分子式:C8H8N2S  度:98.0%   

線(xiàn)粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25  2-Amino-5-nitrobenzophenone  中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式:C13H10N2O3  度:98.0%

線(xiàn)粒體促凋亡蛋白 (SMAC)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Atrazine  1912-24-9  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5  度:98.0%  關(guān)鍵詞:
Taq DNA
聚合酶D-葡萄糖一水  D-Glucose, monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MouseMethylaseELISA試劑盒小鼠化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

十二烷基硫酸鈉(分子生物學(xué)級(jí))  SDS  質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí) 小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 ,英文名: GCK ELISA Kit

聚乙二醇6000  PEG 6000  質(zhì)量規(guī)格:分子量5,000~7,000,分子生物學(xué)級(jí) 小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 96T/48T

吐溫20  Tween 20  質(zhì)量規(guī)格:CP 人分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)試劑盒 Human SFRP4 ELISA Kit

曲拉通X-100  Triton X-100  質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) Ratisletcellaibody,ICAELISAKit大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

胰蛋白胨  Tryptone  質(zhì)量規(guī)格:FMB Grade CDK6蛋白共沉淀分析試劑盒5

生物素;D-生物素;維生素 H 輔酶 R  D-Biotin  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

甘油  Glycerol  質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí) 小鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA試劑盒 ,英文名: GUSβ ELISA Kit

檸檬酸鈉二水;檸檬酸三鈉二水   , tri salt, dehydrate  質(zhì)量規(guī)格:> 99%,BR 人維生素D(VD)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVitaminD,VDELISAKit 96T/48T

明膠  Gelatin  質(zhì)量規(guī)格:藥用級(jí),膠強(qiáng)度 ~240 g Bloom 大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)試劑盒 Rat Tenascin-C,TN-C ELISA Kit
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。


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