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Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541

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更新時間:2017-05-17 19:40:27瀏覽次數(shù):163次

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Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541說明書現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細胞名稱     Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541說明書
形態(tài)特性      上皮樣
生長特性     貼壁生長
特征特性      該細胞是采用慢病毒感染的方式使Du145細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件      RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法      1:4~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況     C3
凍存條件      基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     培養(yǎng)法(-)
STR      Amelogenin:x,y;CSF1PO:10,11;D12S391:18,21;D13S317:12,14;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:12,13;D21S11:30,31,33;D2S1338:16,16;D3S1358:16,16;D5S818:10,13;D6S1043:10,11;D7S820:7,10,11;D8S1179:13,14;FGA:22,22;Penta E:12,14;TH01:7,7;TPOX:11,11;vWA:17,18;
同工酶     
染色體     
使用權(quán)限     A類
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541說明書細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541說明書復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
胸腺素β4(Tβ4)ELISA試劑盒    ,英文名:    Tβ4 ELISA Kit
胸腺素β10(TMSβ10)ELISA試劑盒    ,英文名:    TMSβ10 ELISA Kit
胸腺生成素(TMPO)ELISA試劑盒    ,英文名:    TMPO ELISA Kit
胸腺旁腺素(PTMS)ELISA試劑盒    ,英文名:    PTMS ELISA Kit
胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒    ,英文名:    TARC ELISA Kit
形成素1(FMN1)ELISA試劑盒    ,英文名:    FMN1 ELISA Kit
星形肌動蛋白2(ASTN2)ELISA試劑盒    ,英文名:    ASTN2 ELISA Kit
星形肌動蛋白1(ASTN1)ELISA試劑盒    ,英文名:    ASTN1 ELISA Kit
信號轉(zhuǎn)導銜接分子1(STAM1)ELISA試劑盒    ,英文名:    STAM1 ELISA Kit
信號素7A(SEMA7A)ELISA試劑盒    ,英文名:    SEMA7A ELISA Kit
信號素6D(SEMA6D)ELISA試劑盒    ,英文名:    SEMA6D ELISA Kit
信號素6C(SEMA6C)ELISA試劑盒    ,英文名:    SEMA6C ELISA Kit

人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)免疫試劑盒    Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG ELISA Kit
人視黃酸免疫試劑盒    Human Retinoic Acid ELISA Kit
人食欲素受體(OXR)免疫試劑盒    Human Orexin receptor ELISA Kit
人食欲素/阿立新B(OX-B)免疫試劑盒    Human Orexin B,OX-B ELISA Kit
人腎素(Renin)免疫試劑盒    Human renin,REN ELISA Kit
人腎上腺髓質(zhì)素前體(Pro-ADM)免疫試劑盒    Human Proadrenomedullin,Pro-ADM ELISA Kit
人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒    Human adrenomedullin,ADM ELISA Kit
人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒    Human adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA Kit
人腎上腺素(EPI)免疫試劑盒    Human Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)免疫試劑盒    Human adrenal cortex antibody,ACA ELISA Kit
人蛋白(nephrin)免疫試劑盒    Human Nephrin ELISA Kit
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541說明書人腎胺酶(RNLS/MAO-C)免疫試劑盒    Human Renalase/ Monoamine Oxidase-C,RNLS/MAO-C ELISA Kit
人神經(jīng)軸突絲蛋白(NAFP)自身抗體免疫試劑盒    Human neuron axon filament protein(NAFP)autoantibody ELISA kit
人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)免疫試劑盒    Human NAIP ELISA Kit

 

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