當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526說明書
人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;BALL-1操作步驟
人低分化鼻咽癌細(xì)胞株;CNE2-S18培養(yǎng)
Imatinib耐藥的胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞系;GIST-1210
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526說明書
形態(tài)特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 建議初始濃度2.0×105 cells/ml,1:3傳代;4~5天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:26,26;D13S317:8,11;D16S539:10,10;D18S51:16,16;D19S433:14,16.2;D21S11:31,31;D2S1338:18,18;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;Penta E:10,10;TH01:7,7;TPOX:8,8;vWA:19,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526說明書細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526說明書復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人維生素B6(VB6)免疫試劑盒 Human Vitamin B6,VB6 ELISA Kit
人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)免疫試劑盒 Human Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)免疫試劑盒 Human Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit
人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)免疫試劑盒 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA Kit
人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)免疫試劑盒 Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit
人糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)免疫試劑盒 Human glycated low density lipoprotein,Gly-LDL ELISA kit
人糖化白蛋白(GA)免疫試劑盒 Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit
人糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒 Human gp130 ELISA KIT
人羰基還原酶[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)免疫試劑盒 Human Carbonyl reductase [NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)ELISA kit
人碳酸酐酶9(CA9)免疫試劑盒 Human Carbonic Anhydrase 9,CA9 ELISA Kit
異連蛋白β(DTNβ)ELISA試劑盒 ,英文名: DTNβ ELISA Kit
血小板衍生生長因子受體α(PDGFRα)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFRα ELISA Kit
血小板衍生生長因子D(PDGFD)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFD ELISA Kit
血小板衍生生長因子C(PDGFC)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFC ELISA Kit
血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)ELISA試劑盒 ,英文名: PAFAH2 ELISA Kit
血小板激活因子(PAF)ELISA試劑盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶9(ADAMTS9)ELISA試劑盒 ,英文名: ADAMTS9 ELISA Kit
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)ELISA試劑盒 ,英文名: ADAMTS7 ELISA Kit
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526說明書血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)ELISA試劑盒 ,英文名: ADAMTS5 ELISA Kit
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶4(ADAMTS4)ELISA試劑盒 ,英文名: ADAMTS4 ELISA Kit
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)ELISA試劑盒 ,英文名: ADAMTS1 ELISA Kit
血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)ELISA試劑盒 ,英文名: THBS4 ELISA Kit
血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)ELISA試劑盒 ,英文名: THBS3 ELISA Kit
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