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細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一少精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導,另有細胞培養(yǎng)類產品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產品。歡迎廣大科研用戶!
泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒 ,英文名: UBD ELISA Kit
泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 ,英文名: Ub ELISA Kit
反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒 ,英文名: rT3 ELISA Kit
法尼基二磷酸法尼基轉移酶1(FDFT1)ELISA試劑盒 ,英文名: FDFT1 ELISA Kit
法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒 ,英文名: FXR ELISA Kit
發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒 ,英文名: DNM2 ELISA Kit
二?;视?DAG/DG)ELISA試劑盒 ,英文名: DAG/DG ELISA Kit
二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 ,英文名: DPPⅣ ELISA Kit
二氫嘧啶脫氫酶[NADP+](DPYD)ELISA試劑盒 ,英文名: DPYD ELISA Kit
二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)ELISA試劑盒 ,英文名: DPYSL3 ELISA Kit
二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)ELISA試劑盒 ,英文名: DPYSL2 ELISA Kit
二羥基賴正己氨酸(DHLNL)ELISA試劑盒 ,英文名: DHLNL ELISA Kit
二磷酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒 ,英文名: ADP ELISA Kit
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)免疫試劑盒 Mouse secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit
小鼠肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒 Mouse mycoplasma pneumoniae(MP)antibody(IgG)ELISA kit
小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)免疫試劑盒 Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit
小鼠肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)免疫試劑盒 Mouse Pulmonary Surfactant-associated protein C,SP-C ELISA kit
小鼠肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)免疫試劑盒 Mouse Pulmonary Surfactant-associated protein B,SP-B ELISA kit
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)免疫試劑盒 Mouse Pulmonary surfactant-associated protein A,SP-A ELISA Kit
小鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)免疫試劑盒 Mouse pulmonary surfactant-associated protein D,SP-D ELISA kit
小鼠肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)免疫試劑盒 Mouse Mast Cell Tryptase,MCT ELISA Kit
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910操作步驟小鼠肥大/干細胞生長因子受體(試劑盒/Sl/CD117)免疫試劑盒 Mouse mast/stem cell growth factor receptor,Kit/Sl/CD117 ELISA Kit
小鼠芳香酶免疫試劑盒 Mouse Aromatase,ARO ELISA Kit
小鼠二?;视?DAG/DG)免疫試劑盒 Mouse diacyl glycerol,DAG/DG ELISA Kit
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